操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
EPZ015866 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | FS-X10781 |
產(chǎn)品介紹:
EPZ015866(GSK591)是PRMT5選擇性抑制劑,和EPZ015666相比,EPZ015866有更強(qiáng)的對(duì)PMT酶的抑制作用。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):1616391-87-7 別名:GSK591;GSK3203591 純度:98.71% 分子量:380.48 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
短小芽孢桿菌FSH 禽類聯(lián)免疫Anti-L1CAM Antibody人乙型肝炎病前S2抗原(HBV preS2Ag)
艾比湖嗜鹽堿紅菌LH 禽類聯(lián)免疫Anti-LAIR2 Antibody人乙型肝炎病前S2抗原(HBV preS2Ag)
枯草芽孢桿菌PRL 禽類聯(lián)免疫Anti-LAMA4 Antibody人庚型肝炎病IgM(HGV-IgM)
釀酒酵母魚(yú)雌二Anti-LAMA5 Antibody人庚型肝炎病IgM(HGV-IgM)
指狀游動(dòng)放線菌大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白Anti-LAMA1 Antibody人輸血傳播病/辛型肝炎病((TTV)
蘋果盤二孢菌*兔子腫瘤壞死因子αAnti-LAMB1 Antibody人輸血傳播病/辛型肝炎病((TTV)
鏈格孢小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體Anti-LAMB2 Antibody人戊型肝炎病IgM(HEV-IgM)
解淀粉芽孢桿菌人胸腎表達(dá)趨化因子Anti-LAMB3 Antibody人戊型肝炎病IgM(HEV-IgM)
釀酒酵母人B-淋巴趨化因子Anti-LAMP3 Antibody人戊型肝炎病IgG(HEV-IgG)
蘇云金芽孢桿菌莫里遜亞種小鼠磷脂酰絲Anti-LATS1 Antibody人戊型肝炎病IgG(HEV-IgG)
赤紅球菌兔子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子βAnti-LATS1 Antibody人丁型肝炎IgM(HDV IgM)
Pseudohaliea rubra魚(yú)促腎上腺皮質(zhì)激Anti-LAMC3 Antibody人丁型肝炎IgM(HDV IgM)
尤韋可擬盤多毛孢大鼠可溶性凋亡相關(guān)因子Anti-LDLRAD1 Antibody人丁型肝炎IgG(HDV IgG)
廈門假單胞菌人膜粘連蛋白 Ⅱ ELISA 試劑盒Anti-LDB2 Antibody人丁型肝炎IgG(HDV IgG)
褐球固氮菌(可訂購(gòu))小鼠磷甘油酯Anti-LDB1 Antibody人型肝炎IgM(HCV-IgM)
美味側(cè)耳(紫孢側(cè)耳)大鼠乙酰轉(zhuǎn)移Anti-LDLRAD2 Antibody人型肝炎IgM(HCV-IgM)
維甲受體γ抗體粗壯假絲酵母人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞
Ras相關(guān)區(qū)域家族蛋白4抗體擬熱帶假絲酵母人乳腺癌細(xì)胞(耐阿霉)
細(xì)胞生長(zhǎng)抑制蛋白34馬其頓假絲酵母人胃癌耐藥
Ras樣蛋白家族10A抗體郎比可假絲酵母人結(jié)腸癌細(xì)胞
PRMT5抑制劑(GSK591)紫皮麗菇 10%胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基顆粒軟骨蛋白聚糖G1;G2片段
豬鏈球分型血清參考品 血清型 SS12 胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)顆粒軟骨寡聚基質(zhì)蛋白
釀酒酵母 玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基顆粒狀腺原
桑樹(shù)枝枯病 改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基顆粒神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白
拜耳接合酵母 1-乙酰咪唑神經(jīng)生長(zhǎng)導(dǎo)向因子
鏈格孢 改良馬丁培養(yǎng)基顆粒神經(jīng)生長(zhǎng)因子
熒光假單胞 硫乙鹽流體培養(yǎng)基顆粒神經(jīng)肽Y
枯草芽孢桿 液體硫乙鹽培養(yǎng)基顆粒神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3
毛栓 緩沖蛋白胨水(BPW)顆粒神經(jīng)元烯化
橄欖灰鏈霉 營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA)顆粒腎
根霉 營(yíng)養(yǎng)肉湯(NB)顆粒生長(zhǎng)分化因子15
新月彎孢 平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA)顆粒生長(zhǎng)
巴氏醋桿 MEM維持液生長(zhǎng)抑
奇異球?qū)?/span> Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基管瘦
球孢白僵 Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基管四氫