Hsp90抑制劑(AT13387)正在熱銷的產(chǎn)品：INS(Human Insulin) ELISA Kit 人胰島羅丹明B ≥99.0% (HPLC)
Human C-Peptide ELISA Kit 人C肽羅丹明B ，>99.0% (HPLC)
HCG(Human Chorionic Gonadotrophin) ELISA Kit 人絨毛膜促性腺激紅熒烯 99%
Beta-CG(H
中文名稱：Hsp90抑制劑(AT13387)
英文名稱：AT13387
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10782
產(chǎn)品介紹:
AT13387是Hsp90抑制劑，對A375細(xì)胞的IC50為18nM，具有長效的抗腫瘤活性。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：912999-49-6 別名：Onalespib 純度：99.64% 分子量：409.52 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
大腸埃希氏菌兔子堿性成纖維生長因子Anti-LDLRAD3 Antibody人型肝炎IgG(HCV-IgG)
Marella suaedae人結(jié)締組織活化肽ⅢAnti-LGALS2 Antibody人型肝炎IgG(HCV-IgG)
玫瑰小雙孢菌大鼠白介7Anti-LEF1 Antibody人糖蛋白130(gp130)
釀酒酵母人巨噬集落激因子受體Anti-LEFTY1 Antibody人糖蛋白130(gp130)
金黃回旋鏈霉菌兔子前列腺E2Anti-LFNG Antibody人促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)
熱紫鏈霉菌不滲透亞種魚促卵泡Anti-LFNG Antibody人促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)
核桃殼囊孢菌小鼠β-防御Anti-LGALS7 Antibody人去加壓/1-去基-8-右旋-精加壓(dDAVP)
多形布勒擔(dān)子酵母凋亡原位（我公提供代測服務(wù)）Anti-LGALS8 Antibody人去加壓/1-去基-8-右旋-精加壓(dDAVP)
香菇(L988)大鼠絲/蘇蛋白磷Anti-LGALS9 Antibody人蕈堿型乙酰受體亞型M3(M-AChR M3)
地衣芽孢桿菌魚促黃體激Anti-LHCGR Antibody人蕈堿型乙酰受體亞型M3(M-AChR M3)
盤長孢狀盤孢小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽Anti-LIG3 Antibody人睪受體(TR)
蠟蚧菌A Fc段受體ⅠAnti-LILRA1 Antibody人睪受體(TR)
IBV M41 HAR/HI serum 陽性血清（荷蘭引進(jìn)）兔子5羥色Anti-LIG4 Antibody人蕈堿型乙酰受體(M-AChR)
間型串珠鐮孢兔子β內(nèi)啡肽Anti-LILRA2 Antibody人蕈堿型乙酰受體(M-AChR)
昆明鏈霉菌小鼠神經(jīng)絲蛋白Anti-LILRA4 Antibody人糖蛋白49A(Gp49a)
蘇云金芽孢桿菌蘇云金亞種魚磷化腺活化蛋白激Anti-LILRA5 Antibody人糖蛋白49A(Gp49a)
結(jié)合蛋白1抗體克魯斯假絲酵母小鼠肺腺癌細(xì)胞系
環(huán)指蛋白5抗體E3泛蛋白連接RNF5綠色鏈霉菌人肺癌細(xì)胞
核糖體蛋白L15抗體地生翅孢殼昆蟲細(xì)胞
核糖體蛋白L19抗體奇異翅孢殼鼠黑色瘤細(xì)胞
Hsp90抑制劑(AT13387)紫云英根瘤 Stuart運(yùn)送培養(yǎng)基管松弛
宇佐美曲霉 安息香二甲(DMPA)髓過氧化物
凍膠假絲酵母 Amies運(yùn)送培養(yǎng)基管髓磷脂堿性蛋白
柔嫩艾美耳球蟲 瓷珠種保存管（20支）髓鞘堿性蛋白抗體
枯草芽孢桿 瓷珠種保存管（50支）胎盤生長因子
羅倫隱球酵母羅倫變種 PH6.8磷鹽緩沖液糖聚糖
空腸彎曲桿 6-甲基-1-茚酮天冬蛋白
大腸埃希氏桿 PH7.0的NaCl蛋白胨緩沖液天門冬氨基轉(zhuǎn)移
大腸埃希氏桿 0.1%蛋白胨水同型半胱
芽枝狀枝孢 含200ml鹽水均質(zhì)袋透明質(zhì)
弗雷德里克斯堡假單胞 含200ml鹽水均質(zhì)袋晚期糖基化終末產(chǎn)物受體
拉曼被孢霉 L-苯芐酯鹽鹽胃泌
南方散斑殼 含225ml布氏肉湯均質(zhì)袋間粘附分子1
長枝木霉 含22%胰酪胨大豆肉湯均質(zhì)袋細(xì)脂蛋白
腸桿 含50ml7.5%肉湯均質(zhì)袋纖連蛋白
