kFluor555-EdU法細胞增殖檢測試劑盒(流式)正在熱銷的產品：乙suan激mei（ACK)測試盒 規格：100管/96樣 測試方法：微量法
乙suan激mei（ACK)測試盒 規格：50管/48樣 測試方法：紫外分光光度法
單an氧化mei測試盒 規格：100管/96樣 測試方法：微量法
單an氧化mei測試盒 規格：50管/48樣 測試方法：可見分光光度法
甜菜含量測試盒 規格
中文名稱：kFluor555-EdU法細胞增殖檢測試劑盒(流式)
英文名稱：
產品規格：10T|20T|50T
貨號：FS-X9617
產品介紹:
kFlour555 Click-iT EdU 流式檢測試劑盒,細胞增殖檢測是評估細胞健康程度、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果的基礎實驗手段。精確的檢測細胞增殖方法是BrdU法。EdU法檢測試劑盒是brdu方法的革命性突破。EdU（5-溴-2-脫氧尿嘧）試劑盒是一種嘧啶類似物，可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。EdU法檢測是基于“點擊”反應，一種由銅催化的疊氮化合物和炔烴的原子共價反應。本試劑盒中，EdU試劑含有炔烴，而kFlour555染料試劑含有疊氮化合物。點擊法的EdU標記增殖快速有效，易于使用。只需少量的疊氮化染料即可非常有效地標記出整合的EdU。標準化的固定和去污劑促滲可以使檢測試劑進入細胞，而brdu方法則需要DNA變性（如酸變性、熱變性或者用Dnase消化）去暴露BrdU，從而方便BrdU抗體結合。 |
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
蛋白激meiD1(PRKD1)檢測試劑盒 forProteinKinaseD1(PKD1)
晶狀體蛋白αB(CRYαB)檢測試劑盒 forCrystallinAlphaB(CRYaB)
乙基丙二suan腦病變基因1(ETHE1)檢測試劑盒 forEthylmalonicEncephalopathy1(ETHE1)
絲氨suan/蘇氨suan激mei11(STK11)檢測試劑盒 forSerine/ThreonineKinase11(STK11)
160kDa核孔蛋白(NUP160)檢測試劑盒 forNucleoporin160kDa(NUP160)
親核suα7(KPNα7)檢測試劑盒 forKaryopherinAlpha7(KPNa7)
鯡精an激mei(DOLK)檢測試劑盒 forDolicholKinase(DOLK)
含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)檢測試劑盒 forVonWillebrandFactorADomainContainingProtein3A(vWA3A)
白介su18(IL18)檢測試劑盒 forInterleukin18(IL18)
腦蛋白44(BRP44)檢測試劑盒 forBrainProtein44(BRP44)
TATA框結合蛋白關聯因子12(TAF12)檢測試劑盒 forTATABoxBindingProteinAssociatedFactor12(TAF12)
突觸囊泡蛋白Ⅴ(SYT5)檢測試劑盒 forSynaptotagminV(SYT5)
組蛋白H2B(H2B)檢測試劑盒 forHistoneH2B(H2B)
高分子量激肽原(HMWK)檢測試劑盒 forHighMolecularWeightKininogen(HMWK)
破骨細胞關聯受體(OSCAR)檢測試劑盒 forOsteoclastAssociatedReceptor(OSCAR)
Smad同源物7(Smad7)檢測試劑盒 forMothersAgainstDecapentaplegicHomolog7(Smad7)
巨噬細胞集落刺激因子(MCSF)檢測試劑盒 forColonyStimulatingFactor1,Macrophage(MCSF)
kFluor555-EdU法細胞增殖檢測試劑盒(流式)標準品 規格:250mg 英文名稱：Cocaine Hydrochloride CII
標準品 規格:200mg 英文名稱：Methocarbamol
mi托擔標準品 規格:500mg 英文名稱：Mitotane
雌酚tong標準品 規格:200mg 英文名稱：Estrone
鹽suan標準品 規格:50mg 英文名稱：
N-乙基標準品 規格:0．5ml 英文名稱：N-Ethylpiperazine
lv霉su棕櫚suan酯標準品 規格:200mg 英文名稱：Chloramphenicol Palmitate
無味lv霉suA晶型標準品 規格:200mg 英文名稱：
lv霉suA多晶型標準品 規格:100mg 英文名稱：
去乙?；Z孕酯標準品 規格:25mg 英文名稱：Deacetylnorgestimate
