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中文名稱：RNR抑制劑(COH29)
英文名稱：COH29
產品規格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10805
產品介紹:
COH29是一種高效的RNR抑制劑，具有抗癌活性,在KB細胞中的IC50值為8μM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ 號：1190932-38-7 純度：98.04% 分子量：420.44 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
櫟小皮傘大鼠肉堿脂酰轉移Anti-NECTIN3 Antibody人鈣調結合蛋白(CALD)
大腸埃希氏桿菌兔子補體片斷3aAnti-NECTIN1 Antibody人鈣調結合蛋白(CALD)
枯草芽孢桿菌小鼠溶菌Anti-NEDD1 Antibody人鈣調磷(CaN)
鍋孢霉人CD14分子Anti-NECTIN3 Antibody人鈣調磷(CaN)
栗酒裂殖酵母人凋亡誘導因子Anti-NECTIN3 Antibody人骨退化特異標志物(CTX-2)
耐輻射奇球菌兔子基質金屬蛋白3Anti-NEFH Antibody人骨退化特異標志物(CTX-2)
白僵菌大鼠磷化乙酰羧化Anti-NEFH Antibody人鈣結合蛋白(CR)
釀酒酵母小鼠可溶性CD30Anti-NEFL Antibody人鈣結合蛋白(CR)
臭曲霉兔磷TRAP-5b Anti-NEDD4 Antibody 人骨形成蛋白6(BMP-6)
冠突曲霉人白共同抗原Anti-NEFL Antibody人骨形成蛋白6(BMP-6)
冷桿菌兔子可溶性CD40配體Anti-NEFM Antibody人脂肪結合蛋白(FABP)
聚生殼菌小鼠可溶性肌球蛋白重鏈Anti-NEIL3 Antibody人脂肪結合蛋白(FABP)
海洋桿菌大鼠金屬硫蛋白Anti-NEGR1 Antibody人腺三磷結合盒轉運體A1(ABCA1)
膜醭畢赤酵母大鼠心肌特異性肌鈣蛋白TAnti-NEIL3 Antibody人腺三磷結合盒轉運體A1(ABCA1)
化妝品 霉、小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1Anti-NEFM Antibody人羥脯糖蛋白(HRGP)
釀酒酵母兔主要組織相容性復合體Ⅰ類Anti-NEK2 Antibody人羥脯糖蛋白(HRGP)
胰島β細胞生長因子抗體邊莢魚藤根瘤菌人涎腺腺樣囊性癌細胞
環指蛋白149抗體假地豆根瘤菌人T淋巴細胞白血病細胞
心臟蛋白磷1結合蛋白/環指蛋白158抗體波葉山螞蟥根瘤菌人胎盤絨毛癌細胞
環指蛋白180抗體本氏木蘭根瘤菌人急性淋巴母細胞白血病細胞
RNR抑制劑(COH29)香菇* 固體培養基低氧誘導因子-1β
成晶節桿 改良GAM瓊脂抑劑水通道蛋白1
多脂鱗傘 高鹽度腦心浸液肉湯水通道蛋白2
枯草芽孢桿 膽汁七葉瓊脂水通道蛋白3
蘇云金芽孢桿太平洋亞種 腦心浸液肉湯腎損傷分子1
柱狀田頭菇（茶樹菇、楊樹菇） 酵母蛋白胨培養基氧化三
巴貝斯蟲（青海貴南株） 胰蛋白胨大豆瓊脂血管生成1
耐冷冷桿 類桿-膽汁-七葉（BBE）瓊脂血管生成2
大毛霉 鋰鹽改良MRS培養基血小板反應蛋白;凝血敏感蛋白1
大腸埃希 甘露瓊脂培養基CD31分子
尖角凸臍蠕孢 3,5-雙(三氟甲基)苯甲酰基質金屬蛋白2
金黃桿屬 KF鏈球肉湯白介12
蘋果黑腐皮殼 RODAC培養皿（TSA）活化蛋白C
新疆鹽地桿 鋰鹽自然殺傷
麻疹孿生球 四硫磺鹽煌綠增液（TTB肉湯）主要急性期蛋白
