產(chǎn)品名稱 | 原代大鼠胃黏膜上皮細(xì)胞 | 英文名稱 | Rat Gastric Mucosal Epithelial Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號(hào) | GOY-01X0838 |
組織來源 | 胃組織 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠胃黏膜上皮分離自胃黏膜組織；胃黏膜柔軟，活體呈橘紅色。胃空虛時(shí)形成許多皺襞，充盈時(shí)變平坦。幽門處的黏膜形成環(huán)形皺襞，突向腔內(nèi)稱幽門瓣。胃黏膜可分為三層，即上皮層（單層柱狀上皮）、固有層（由結(jié)締組織構(gòu)成、含有大量的胃腺）和黏膜肌層（為薄層平滑肌、排列成內(nèi)環(huán)外縱）。胃黏膜上皮細(xì)胞源自胃黏膜的上皮層，細(xì)胞為單層柱狀上皮，排列整齊，能分泌黏液覆蓋于胃黏膜的表面，防止胃酸和胃蛋bai白酶對(duì)胃黏膜的損害。體外培養(yǎng)胃黏膜上皮細(xì)胞為研究細(xì)胞功能及致病因子、藥物、激素對(duì)細(xì)胞的損傷、保護(hù)和功能調(diào)控提供了簡(jiǎn)單而的模型。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胃黏膜上皮采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胃黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、您收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作：
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時(shí)或過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代：
1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）待細(xì)胞貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存：
1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，再加入培養(yǎng)液終止消化，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）用適當(dāng)量的凍存液（基礎(chǔ)培養(yǎng)基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇：
1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中，滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞，然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中；
3）放置于37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）第二天，換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
抗P24蛋白單抗雜交瘤細(xì)胞；8H1 | 小鼠雜交瘤細(xì)胞；2B10G10D10F7 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；c7b8c3 | 綿羊皰疹病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；c7b8c1 | 綿羊皰疹病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；c7b8a5 | 綿羊副流感病毒3型PCR檢測(cè)試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；c7b8b5 | 綿羊皰疹病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；c7b8F10 | 孟氏尖旋線蟲PCR檢測(cè)試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；c7b8a8 | 副球孢子菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
人B淋巴細(xì)胞 | 副流感病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；F6E4F8b2 | 綿羊星狀病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；D11E8A1H9 | x綿羊星狀病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；D11E8A1A4 | 綿羊星狀病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；D11E8A1G10 | 三叉奧斯特線蟲PCR檢測(cè)試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；D11E8A1E6 | 原代大鼠胃黏膜上皮細(xì)胞奧斯特線蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；D11E8A1F11 | 波氏奧斯特線蟲PCR檢測(cè)試劑盒 |
溶組織阿米巴檢測(cè)試劑盒 | 四輻射鳥圓線蟲PCR檢測(cè)試劑盒 |
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 從胸部解剖乳鼠，取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中，盡可能的除去結(jié)締組織等，
3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中，倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中，
4) 2h后，培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基，小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱，確保組織塊不會(huì)飄起來，
5) 每3d換液2mL，待細(xì)胞從組織塊中爬出來后，隔2d換液，待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時(shí)，去除組織塊，將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
