小鼠elisa試劑盒 研究背景：隨著人類老齡化的發(fā)展,骨質(zhì)疏松癥患者日益增多。

女性絕經(jīng)后由于激素水平顯著下降,骨丟失加速,從而成為骨質(zhì)疏松和骨質(zhì)疏松性骨折的高危人群。在骨質(zhì)疏松的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中,Ⅰ型膠原扮演著非常重要的角色,目前也越來(lái)越引起人們的重視。維生素K2自1960年被發(fā)現(xiàn)對(duì)骨折愈合有一定作用后,逐漸成為了骨質(zhì)疏松的治療用藥,但其對(duì)骨代謝影響尤其是骨膠原的影響機(jī)制研究較少。

目的：觀察維生素K2對(duì)去卵巢大鼠Ⅰ型膠原代謝指標(biāo)的變化,電鏡下觀察骨膠原形態(tài)學(xué)改變,以及生物力學(xué)的改變,從Ⅰ型膠原方面探討維生素K2對(duì)骨質(zhì)疏松預(yù)防和治療作用。

方法：將60只成年雌性SD大鼠隨機(jī)分為維生素K2組(VitK2組)20只,卵巢摘除組(OVX組),對(duì)照組(SHAM組)20只。VitK組與OVX組行手術(shù)去勢(shì),摘除雙側(cè)卵巢。常規(guī)分籠飼養(yǎng)12周后,VitK2組給予四烯甲萘醌,喂養(yǎng)八周后處死大鼠,采用ELISA法檢測(cè)血Ⅰ型前膠原氨基端前肽(PINP)值、血Ⅰ型膠原交聯(lián)氨基端肽(NTX)值。

取松質(zhì)骨染色制片后,光鏡下觀察骨組織結(jié)構(gòu)變化以及骨膠原形態(tài)。取大鼠左股骨遠(yuǎn)三分之一段,沿冠狀面正中鋸開(kāi),經(jīng)固定、沖洗、脫水、干燥、噴金后制成電鏡觀察標(biāo)本后,在掃描電鏡下觀察骨小梁以及膠原的分布情況。取大鼠脛骨干骺端,通過(guò)免疫蛋白印跡法分別檢測(cè)大鼠骨組織中Ⅰ型膠原蛋白含量。取大鼠右側(cè)股骨,在電子材料試驗(yàn)機(jī)上進(jìn)行力學(xué)實(shí)驗(yàn),分析骨的生物力學(xué)性能。

結(jié)果：卵巢摘除組光鏡下HE染色見(jiàn)骨小梁稀疏,斷裂, Masson染色見(jiàn)膠原纖維排列稀疏紊亂,變細(xì)甚至斷裂溶解,連續(xù)性差,股骨生物力學(xué)測(cè)定屈服點(diǎn)載荷(99.4±10.2N), NTX明顯升高,PINP無(wú)明顯變化,電鏡觀察見(jiàn)膠原纖維排列紊亂、零散,結(jié)構(gòu)松散、斷裂,被破壞的骨膠原失去正常形態(tài),免疫蛋白印跡見(jiàn)Ⅰ型膠原蛋白含量表達(dá)減少。

維生素K2組HE染色下骨小梁致密,Masson染色見(jiàn)膠原纖維排列規(guī)則,走向清晰,連續(xù)性好,股骨生物力學(xué)測(cè)定屈服點(diǎn)載荷(120.8±14.7N), NTX明顯降低,PINP稍有升高,電鏡觀察見(jiàn)膠原纖維走向清晰,排列整齊、緊密,排列之間有斜向纖維,免疫蛋白印跡見(jiàn)Ⅰ型膠原蛋白含量表達(dá)增加。

結(jié)論：1.維生素K2可促進(jìn)骨膠原合成并可以抑制骨膠原降解,可有效增加絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的骨膠原含量與質(zhì)量。2.維生素K2可改善骨小梁形態(tài)從而提高骨生物力學(xué)性能有效降低骨質(zhì)疏松性骨折的發(fā)生率。

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