ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在科研上得到了廣泛的運用，但操作中的各個環節對試驗的檢測作用影響較大，ELISA試劑盒如不留意，有也許致使顯色不全、花板等成果。今日我們將操作中各個環節常出現疑問解決辦法總結于下，整理出應對戰略：
挑選試劑：挑選質量優良的檢測試劑，嚴格依照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
標本搜集與保留：防止運用肉眼可見的溶血標本、高脂標本和混濁標本；2-8℃下，標本可放置24-48小時，長時間保留需放置-20℃下。請防止重復凍融。
試劑盒中會有提示，通常需求預備的有：
洗滌液；用前制造；有的試劑盒會標明，配好的4度下通常能夠放一個月；假如沒有標明，盡量用新鮮的，不要多制造。
顯色液（有A液和B液的），用前15分鐘制造；
規范品：有的試劑盒中規范品是現已制造好的，4度保留，有的是要現制造的，依照說明書操作；
濃縮*的二抗和HRP：假如需求制造，ELISA試劑盒沒注明配好能夠保留多久的話，盡量現配現用（用前15分鐘制造）；
    原則是：試劑盒上沒有指出制造物的貯藏方法的話，應當現配現用；不要怕麻煩；還有小瓶的管子開蓋前要離心，避免蓋子上粘連今后總量不行。室溫溫育的試劑，特別是溫育時間比較短的試驗操作的試劑，加樣對數據的影響比較大，特別要留意加樣疑問。
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