ELISA試劑盒其次每次試驗的標曲上同一濃度樣品的OD值不相同是很正常的，這與抗原抗體反響系統、效果時刻、顯色時刻等等一系列的要素有關。判定該ELISA試劑盒系統是不是牢靠，zui關鍵的方針是加標回收率和稀釋線性，假定你懷疑的話能夠做一下。但是只需不要差錯太大就好，通常差錯懇求10%內吧，好的數據是3%內。首先要安穩所有的條件，不相同的條件下做的板子讀值不相同很正常。在相同條件下同批次的板子，假定測定不相同，即是包被疑問或許保護劑的疑問，但這兩個都是各個試劑盒的秘要別人怎樣做的。

   所謂的單波長比色等于通常的以對顯色具有zui大吸收的波長如450nm或492nm進行比色測定；而雙波長雙色則酶標儀在活絡波長如450nm和非活絡波長630nm下各測定一次，活絡波上下的吸光度測定值為樣本測定酶反響特異顯色的吸光度與板孔上指紋、刮痕、塵土等臟物所構成的的吸光度之和；非活絡波長下測定即改動波長至一定值，使得樣本測定酶反響特異顯色的吸光度值為零，此時測得的吸光度即為臟物的吸光度值。

   ELISA試劑盒操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。洗滌液；用前制造；有的試劑盒會標明，配好的4度下通常能夠放一個月；假定沒有標明，盡量用新鮮的，不要多制造。顯色液（有A液和B液的），用前15分鐘制造；標準品：有的試劑盒中標準品是現已制造好的，4度保存；有的是要現制造的；依照說明書操作；濃縮*聯絡的二抗和HRP：假定需求制造，試劑盒沒注明配好能夠保存多久的話，盡量現配現用（用前15分鐘制造）；  

  原則是：ELISA試劑盒上沒有指出制造物的貯藏方法的話，應當現配現用；不要怕麻煩；還有小瓶的管子開蓋前要離心，避免蓋子上粘連往后總量不可。