ELISA試劑盒當抗原材料中的攪擾物質不易除掉，或不易得到滿足的純化抗原時，可用此法檢測特異性抗體。其原理為標本中的抗體和一定量的酶標抗體競賽與固相抗原結合。標本中抗體量越多，結合在固相上的酶標抗體愈少，因而陽性反響呈色淺于陰性反響。如抗原為高純度的，可直接包被固相。如抗原中會有攪擾物質，直接包被不易成功，可選用捕獲包被法，即先包被與固相抗原相應的抗體，然后參加抗原，構成固相抗原。洗刷除掉抗原中的雜質，然后再加標本和酶標抗體進行競賽結合反響。競賽法測抗體有多種形式，可將標本和酶標抗體與固相抗原競賽結合，抗HBc ELISA一般選用此法。另一種形式為將標本與抗原一同參加到固相抗體中進行競賽結合，洗刷后再參加酶標抗體，與結合在固相上的抗原反響。抗HBe的檢測一般選用此法。
實驗過程 
1.  以稀釋液將待檢標本做恰當稀釋（預試中斷定）參加包被有已知抗原的酶標板中（50ul/孔），加封口膠帶于37℃作用30min。
2.  棄反響液，以沖洗液接連洗板5次并于吸水紙上拍干。
3.  參加酶標抗體（濃度在預試中斷定）。加封口膠帶后于37℃作用30min。
4.  重復第2步。
5.  加底物（濃度在預試中斷定），加封口膠帶后于室溫下避光作用5-60 min，其間不時調查，顯色滿意后加停止液50ul/孔。
6.  于酶標儀測定OD值，OPD用492nm測定，TMB用450nm測定。
ELISA試劑盒注意事項 
1.  每次實驗均應做陰性對照、陽性對照及空白對照（以PBS替代標本），后者為本底值，在剖析實驗成果時應扣除本底值，陽性對照<陰性對照<空白對照實驗成立。
2.  一般以為小分子抗原宜用本法檢測，而大分子抗原則宜選用夾心法檢測，但詳細宜選用哪種辦法
應根據實驗決定，本發與夾心法比較在操作上削減一步。包被抗體與酶標抗體如果別離選用單克隆抗體和多克隆抗體時，宜用單克隆抗體作為包被抗體，以多克隆抗體作為酶標抗體。3.  血清標本中抗原濃度一般較低，故一般用原倍標本進行檢測，必要時可進行稀釋測定，但應從頭探索酶標抗原的濃度，以保證辦法的靈敏性。
4.  以酶符號抗原的辦法同酶符號抗體。
5.  其它注意事項同酶聯免疫間接法。
ELISA試劑盒競賽法測抗原的原理與過程中，如您有任何疑問可聯絡我們咨詢。