切好的冷凍切片立即投入丙酮中進(jìn)行固定，通常固定1～2 min即可進(jìn)行染色，用于免疫組化染色的冷凍切片應(yīng)在切片略干時(shí)立刻投入冷甲醇中固定10~15 rmin然后進(jìn)行相應(yīng)的安排化學(xué)染色程序。
1．冷凍切片的HE染色程序。
切片在丙酮中固定1～2 min。
水洗5 s。
在0.5％的鹽酸乙醇液中分解1～3 s。
水洗5 s。
甲苯I、二甲苯Ⅱ通明各5 s。
運(yùn)用新鮮的Harris蘇木精染液染細(xì)胞核2min。
水洗5 s。
干安排周圍的二甲苯，在二甲苯尚未枯燥前滴加光學(xué)樹脂膠封片。
在0.5％～1％的伊紅染液中染細(xì)胞質(zhì)20~30 s。
水洗5 s。
在95％乙醇I、95％乙醇Ⅱ、100％乙醇I、ELISA試劑盒100％乙醇Ⅱ、中逐級脫水各3～5 s。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)冷凍切片的制作辦法
運(yùn)用氯乙烷噴灑、二氧化碳噴發(fā)、半導(dǎo)體制冷的辦法均可制作通常的冷凍切片，用于術(shù)中的病理確診。恒冷箱冷凍切片機(jī)可以制作適用于各種目地的冷凍切片，是現(xiàn)在zui為常用的抱負(fù)冷凍切片制片方法。
標(biāo)本冷凍完成后將標(biāo)本托固定在切片機(jī)的機(jī)頭上，調(diào)整機(jī)頭方位使其剛好坐落切片刀的后方。
將恒冷箱冷凍切片機(jī)的速凍頭和箱內(nèi)溫度調(diào)整到適合的切溫度，通常狀況下為一18～一25℃。
運(yùn)用粗切削方法進(jìn)行標(biāo)本的粗切削至露出標(biāo)本的zui大平面，ELISA試劑盒運(yùn)用主動推動方法接連切削2～3刀后用毛筆清除機(jī)頭、標(biāo)本托及切片刀上的安排碎屑。
以主動推動的方法進(jìn)行切片，杰出的切片將在防卷板的下方形成一張完好平坦的薄片，如切片略有曲折可用小毛筆悄悄展平切片。
在標(biāo)本冷凍托上涂布一層*一OCT，然后將選材后新鮮標(biāo)本安放在標(biāo)本冷凍托上并用OCT掩蓋標(biāo)本。
打開防卷板，用載玻片平穩(wěn)地輕壓切片使其平坦地吸附到載玻片上。
調(diào)整并承認(rèn)切片的厚度，通常為4～8 um，染脂肪和神經(jīng)安排應(yīng)控制在12~25 um。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)放下防卷板使防卷板的方位剛好與切片刀的刀刃*平行并略突出于刀刃。