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30min植物基因組DNA提取試劑盒

參  考  價:936
具體成交價以合同協議為準
  • 型號

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質

    經銷商

  • 所在地

    上海市

規格

50T 936元 15盒可售

更新時間:2023-11-06 16:39:49瀏覽次數:338次

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貨號 A-PJ1169 分類 核酸純化專題
規格 50T 品牌 撫生
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公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

產品介紹:

30min植物基因組DNA提取試劑盒該試劑盒采用裂解液,可快速可靠的從多糖、多酚含量較高的植物組織樣品中純化出高純度的 DNA。應用本試劑盒提取的 DNA 可直接用于限制性酶切反應、PCR、文庫構建、Southern 雜交等多種分子生物學實驗。

注意事項:
(1) 本試劑盒中的 Washing Buffer 中已經加乙醇,無需單獨添加。
(2)蛋白酶 K 和 Rnase A 長期保存請儲存于-20℃,短期室溫保存(6 個月),其它組分儲存于室溫。
(3)Plant AP2 含有 CTAB,室溫儲存會出現白色沉淀,使用前放置于 56℃水浴鍋中溶解后使用。
(4)自備試劑:氯仿。
操作方法
(1)樣本組織懸液制備研缽研磨法:在 1.5 ml EP 管中加入 600 μl 的 Plant AP1 裂解液,并在管蓋上加入 5 μl 的 Rnase A。將研磨后的植物組織(干重 40~60 mg,濕重 150 mg)加入到 Plant AP1 裂解液中,漩渦震蕩混合 15s。鋼珠研磨法:在研磨 EP 管中加入 700 μl 的 Plant AP1 裂解液,加入植物組織(干重 50~80 mg,濕重 200 mg),并加入鋼珠進行研磨,研磨完畢后,取 600 μl 的組織懸液到新的
1.5 ml EP 管中,并在管蓋上加入 5 μl 的 Rnase A。
(2)向上述組織懸液中加入 250 μl Plant AP2 裂解液,漩渦混合 15s,56℃水浴鍋(或室溫)靜置 5min,以消化 RNA。
(3)向上述溶液中加入 20 μl 蛋白酶 K,漩渦混合 10s,于56℃水浴鍋(或室溫)中消化 5~15min。
(4)13,000rpm 離心 5min,吸取 600 μl 上清到新的 1.5mlEP 管中,并加入 500μl 的氯仿,漩渦混合 15s。
(5)13,000rpm 離心 2min,溶液將分為無色上層水相DNA)、中間層(蛋白)和綠色下層油相(酚類)。
(6)吸取 400 μl 上層無色上清液到新的 1.5 ml EP 管中,并加入 450 μl 的 Plant LB3 溶液,漩渦 10s 后,倒入到吸附柱中,13,000rpm 離心 1min。
(7)倒掉廢液。向吸附柱中加入 500 μl Washing Buffer,13,000rpm 離心 15s。重復此步驟一次。
(8)將吸附柱重新放回離心機,13000rpm 空離心 2min,將殘留的乙醇甩干。
(9)將吸附柱芯放入到 1.5 ml 收集管中,向吸附柱芯中加入 60~150 μl DNA Elution Buffer,室溫放置 1min,13,000rpm 離心 1min,洗脫液即為基因組 DNA,冷凍保存。


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