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Dnase I(Rnase free)

參  考  價:624
具體成交價以合同協議為準
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    經銷商

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    上海市

規格

1000U 624元 15盒可售

更新時間:2023-11-06 15:44:33瀏覽次數:230次

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貨號 A-PJ1121 分類 核酸酶系列
規格 1000U 品牌 撫生
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公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

產品介紹:

Dnase I(Rnase free)該酶是將單鏈或雙鏈 DNA 同等程度的隨機分解,生成具有 5′-P 末端寡核苷酸的脫氧核糖核酸內切酶。由于RNase-free DNase I 中 Protease 已幾乎被去除,從而提高了該酶在 pH 中性區域的穩定性。此外該酶中添加了
Rnase Inhibitor,用于抑制 RNA 樣品中殘留的 RNase 核酸酶,因此可以有效抑制 RNA 提取過程中 Rnase 酶對 RNA的降解。Stop Buffer 終止反應后,可通過一步加熱失活DNase I 活性。

活性定義
在 50 μl 體系下,37℃ 10min 條件下消化 1 μg pBR322質粒 DNA 所需的酶量定義為 1 個活性單位。純度
2 U 的本酶和 1 μg 的 16S, 23S rRNA 在 37℃、pH7.5 的條件下反應 1 小時,RNA 的電泳譜帶不發生變化
應用:去除 RNA 樣品中的 DNA 污染。
儲存:-20°C 可保存 2 年。
操作方法(去除 RNA 中的基因組 DNA 污染)
1. 按以下組分配制反應體系
RNA 1~50 μg
10× RD Buffer 2 μl
Rnase Free DNase I (2 U/μl) 1 μl*
Rnase Free H2O Up to 20 μl
*若 RNA 樣品中含有超過 5 μg 基因組 DNA 污染,請使用2 μl 該酶。
2. 37°C 孵育 15min 以消化去除基因組 DNA。
3. 孵育完畢后加入 2 μl 10× RD Stop Buffer,混合均勻室溫放置 1min,并置于 75°C 10min 加熱失活 DNase I。樣品可直接用于下一步反轉錄等試驗。
注意:
1)通常加熱方法即可失活 DNase I。如需要去除殘留的變性蛋白,可在 37°C 消化完畢后使用酚氯仿抽提并沉淀 RNA樣品(不進行加熱操作)。
2)10× RD Stop Buffer 中含有螯合劑用于去除二價陽離子,進行加熱失活前,必須加入 2 μl 10× RD Stop Buffer 并混合均勻,再進行熱失活,否則會導致 RNA 降解。
3)處理完畢的 RNA 樣品進行一步反轉錄反應時,添加量需要<20%(如 20 μl 的反轉錄體系中加入量要<4 μl)


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