免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
CCL1/I-309/TCA3/FITC  熒光素標(biāo)記嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL1IgG感染性蛋白蛋白12,4-二氯-3,5-二硝基三氟甲Mouse F-β (Tumor necrosis factor β) 檢測(cè)試劑盒

CCL3/MIP-1 Alpha/FITC  熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞炎性蛋白1αIgG含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族5間氯異酸酯Mouse TRAIL R1 (Tumor Necrosis Factor-related Apoptosis-inducing Ligand 1) 檢測(cè)試劑盒

CCL4/MIP-1 Beta/FITC  熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞炎性蛋白1βIgG植物生長(zhǎng)激素ABP1間氯異酸酯Mouse TRAIL R3 (Tumor Necrosis Factor-related Apoptosis-inducing Ligand 3) 檢測(cè)試劑盒

CCL5/RAES/FITC  熒光素標(biāo)記調(diào)節(jié)活化的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的因子IgG磷酸化活化復(fù)制因子2間氯異酸酯Mouse TRAIL R4 (Tumor Necrosis Factor-related Apoptosis-inducing Ligand 4) 檢測(cè)試劑盒

CCL6/C10/FITC  熒光素標(biāo)記嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL6IgGalpha 1腎上腺素能受體B阿替洛爾Mouse TP53 (Tumor Protein 53) 檢測(cè)試劑盒   

CCL9/CCL10/MIP-1 Gamma/FITC  熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1γIgGBcl2 alpha蛋白阿替洛爾Mouse TSGF (Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor) 檢測(cè)試劑盒

CCL11/FITC  熒光素標(biāo)記嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白IgG白細(xì)胞抗原B相關(guān)轉(zhuǎn)錄蛋白5氯烯酯Mouse TRY (Tyrosinase) 檢測(cè)試劑盒

CCL12/MCP-5/FITC  熒光素標(biāo)記單核細(xì)胞趨化蛋白5IgGBTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白1（型肝炎病的NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8）氯烯酯Mouse Ub (Ubiquitin) 檢測(cè)試劑盒

DCP/FITC  熒光素標(biāo)記異常凝血酶原/脫-γ-羧基凝血酶原IgG9號(hào)染色體開放閱讀框624-氯丁酸甲酯Rat DAT (Dopamine Transporter) 檢測(cè)試劑盒

DCP /HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記異常凝血酶原/脫-γ-羧基凝血酶原IgG9號(hào)染色體開放閱讀框642,4-二溴甲R(shí)at TM (Thrombin) 檢測(cè)試劑盒

DCX/FITC  熒光素標(biāo)記雙皮質(zhì)素IgG9號(hào)染色體開放閱讀框662,4-二溴甲R(shí)at DNM1 (Dynamin 1) 檢測(cè)試劑盒

Phospho-Doublecortin (Ser297) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠等磷酸化雙皮質(zhì)素IgG9號(hào)染色體開放閱讀框682,4-二溴甲R(shí)at DMD (Dystrophin) 檢測(cè)試劑盒

D-DIMER/FITC  熒光素標(biāo)記交聯(lián)纖維蛋白二聚體IgG9號(hào)染色體開放閱讀框74-溴-3,5-二甲氧基甲R(shí)at E-Cad (E-Cadherin) 檢測(cè)試劑盒

DDAH-II /FITC   熒光素標(biāo)記雙甲基精氨酸水解酶2IgG9號(hào)染色體開放閱讀框714-溴-3,5-二甲氧基甲R(shí)at E2 (Estradiol) 檢測(cè)試劑盒

DDB1/FITC  熒光素標(biāo)記損傷DNA結(jié)合蛋白1IgGK-酪蛋白叔丁基亞磺酰氯Rat EGR1 (Early Growth Response Protein 1) 檢測(cè)試劑盒

DDB2/FITC  熒光素標(biāo)記損傷DNA結(jié)合蛋白2IgG20號(hào)染色體開放閱讀框262,8-二溴二并噻吩Rat EGR2 (Early Growth Response Protein 2) 檢測(cè)試劑盒
去整合素樣金屬蛋白酶13抗體Saccharomyces│chevalieri提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no淀粉發(fā)酵制酒精。培養(yǎng)基: CM0077生長(zhǎng)條件: 28-30℃真空冷凍干燥法

Eerobacter│sp.分離基物: 土樣提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 206生長(zhǎng)條件: 50℃-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他

Acidovorax│radicis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 470生長(zhǎng)條件: 18℃真空冷凍干燥法

Pseudomonas│aeruginosa分離基物: 分泌物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式株: no培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 37℃-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Eerobacter│sp.分離基物: 礦石提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no以磷酸三鈣、磷礦石作為磷源生長(zhǎng)培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30℃-80℃冰箱凍結(jié)法；定期移植法

Alternaria│sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no抗癌活性培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 28C-80℃冰箱凍結(jié)

Aspergillus│oryzae分離基物: 曲子提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no以葡萄糖為原料發(fā)酵生產(chǎn)曲酸。培養(yǎng)基: CM0358生長(zhǎng)條件: 28~30℃真空冷凍干燥法；定期移植法

Lactobacillus│sp.分離基物: 泡菜（青菜,蘿卜,豇豆）提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no制作泡菜。培養(yǎng)基: CM0006生長(zhǎng)條件: 37℃真空冷凍干燥法；定期移植法

Escherichia│coli分離基物: LB培養(yǎng)基提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no銅綠假單胞etfB基因基因敲除質(zhì)粒保藏培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 37℃-80℃冰箱凍結(jié)法