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大鼠甲狀旁腺激素(PTH) elisa試劑盒?操作步驟

時間:2021/9/22閱讀:706
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大鼠甲狀旁腺激素(PTH) elisa試劑盒操作步驟:


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

三氟醋柳酸;三氟柳(T2005000

三芐糖甙(Y0000165

三芐糖甙 雜質A(Y0000166

賽洛唑啉 雜質A(X0101000

噻奈普汀鈉 - 對照譜圖(Y0000151

噻奈普汀:用于系統適用性試驗(Y0000152

噻奈普汀 雜質A:7-溴庚酸乙酯(Y000015 

噻洛芬酸(T110900

噻洛芬酸 雜質C(T110910

噻氯匹定 雜質F(T12 025

噻康唑:用于系統適用性試驗(Y0000282

噻康唑 - 對照譜圖(Y0000292

噻噸(T1 05100

噻苯達唑;噻菌靈(T110000

乳酸鎮痛新;乳酸噴他佐辛 - 對照譜圖(Y000017

肉桂酸0 6551

肉桂酸0 655-025

肉桂醛0 662-250

肉桂醛0 6621

肉桂醛0 655

肉桂醛0 65-050

肉桂醋酸0 6581

肉桂醇0 6591

群多普利(Y0000501

群多普利 雜質D(Y000096

群多普利 雜質C(Y000095

去氧腎上腺素(P120000

曲司氯胺;托司氯銨(Y000029

曲司氯銨雜質C(Y0000 0

曲司氯銨雜質B(Y0000 1

曲司氯銨雜質A(Y0000 2

曲匹地爾(T1820000

曲匹地爾 雜質B: -氨基-1,2,-三氮唑(T182000

曲匹地爾 雜質A(T1820002

曲美他嗪:用于系統適用性試驗(Y000009 

曲馬唑啉 雜質B(Y0000066

曲馬唑啉 雜質A(Y0000065

曲克蘆丁(Y000097

曲康唑(T0060000

曲安西龍;曲安奈德(T1899990

曲安西龍 雜質C;曲安奈德 雜質C(Y0000050

秋水仙素;秋水仙堿0 702

青霉素V;苯氧甲基青霉素(P1000000


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