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測定意義

土壤汞污染能夠通過食物鏈傳遞和富集，對植物、動物和人類健康產(chǎn)生威脅。礦山開發(fā)、工業(yè)加工、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生活垃圾常常造成土壤汞污染，因此評價和防止土壤重金屬污染常常需要測定土壤汞含量。

測定原理：

土壤經(jīng)消化后，汞以Hg2+離子形式存在；Hg2+能與二硫腙生成橙色絡合物，溶于后，在490nm測定吸光度，即可計算S-Hg含量。

自備儀器和用品：

紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、可調(diào)式移液槍、100目篩（可更小）、濃硫酸、濃鹽酸、濃硝酸、和蒸餾水。

實驗方法學：

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

9號染色體開放閱讀框61抗體Human ALDOA(Aldolase A, Fructose Bisphosphate) ELISA Kit人骨橋素（OPN）ELISA試劑盒,OPN ELISA

C末端結(jié)合蛋白2抗體Human Anti-AChR(Anti-Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit人骨成型蛋白2（BMP-2）ELISA試劑盒,BMP-2 ELISA

21號染色體開放閱讀框13抗體Human ALP(Alkaline Phosphatase) ELISA Kit人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員3（EAR3）ELISA試劑盒,EAR3 ELISA

冠蛋白3抗體Human AMA IgA(Anti-Myelin antibody IgA) ELISA Kit人蛋白（PRSS）ELISA試劑盒,

周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human anti AMPH(anti amphiphysin) ELISA Kit人熱休克蛋白90（HSP-90）ELISA試劑盒,

膽固25羥化抗體Human ANG I(Angiotensin I) ELISA Kit人多功能蛋白聚糖（VS）ELISA試劑盒,

天冬-胱特異性蛋白家族抗體Human ANG II(Angiotensin II) ELISA Kit人α半乳糖基抗體（Gal）ELISA試劑盒,

鈣營養(yǎng)蛋白1/鈣結(jié)合蛋白8抗體Human AMPK(Phosphorylated Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase) ELISA Kit人纖調(diào)蛋白（FMOD）ELISA試劑盒,

土壤汞（SHg）濃度可見分光光度法Ephrin-B2(EFNB2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)免疫試劑盒進口、分裝

大鼠血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒*直銷

CCAAT增強子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)免疫試劑盒*直銷

肝X受體α(LXRα)免疫試劑盒*直銷

EB病毒核抗原3A抗體(IgG)免疫試劑盒進口、分裝

巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒進口、組裝

小鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。