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大鼠骺軟骨細胞

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

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廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-19 11:54:11瀏覽次數:160次

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科研菌種
生化檢測試劑盒
科研細胞
原代細胞
細胞培養
貨號 GOY-01X1180
大鼠骺軟骨細胞公司正在出售的產品:62006-39-7洋川芎內酯A 規格: HPLC≥98%,50mg/vial
金盞銀盤 規格: 2.0g
炔呋;純品型;標準品;有證書 規格: 0.1g
6155-35-7鼠李糖 規格: HPLC≥98%;20mg/vial
474-25-9 規格: 30mg
牛蒡 規格: 20mg
北豆根 規格: 1g
471-54-5異古倫賓;IsocoluMbin 規格:

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

大鼠骺軟骨細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X1180

商品介紹:

名稱 大鼠骺軟骨細胞

2.組織來源:生長板組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠骺軟骨細胞分離自骨骺生長板;骨骺生長板位于長骨兩端骨骺和骨干之間的軟骨組織,其中的骺軟骨細胞可分裂、成熟、肥大,最終被骨組織所替換,對于長骨生長具有重要作用。幼稚的骺軟骨細胞位于軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與軟骨表面平行,越向深層的骺軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形,染色淺,細胞質弱嗜堿性,常見數量不一的脂滴。成熟的骺軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內,這些骺軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,骺軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質內有大量的粗面內質網和發達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中,骺軟骨細胞收縮為不規則形,在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養的骺軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡介:

()實驗室分離的大鼠骺軟骨細胞采用膠原酶-中性聯合消化并軟骨細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的大鼠骺軟骨細胞型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-R163

換液頻率每3-4天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態梭形、多角形

傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態最佳

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

1瓶 MCF 7B細胞株 MCF 7B 低溫運輸和保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Tyrosine 3-monooxygenase

TGY瓊脂  250g 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Transmembrane 4 L6 family member 20

25mg 蛋白 K Proteinase K  4℃保存 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Complement factor D?嵌?L?

大鼠骺軟骨細胞Goat Anti-rabbit IgG/FITC  FITC標記的羊抗兔IgG 規格: 0.3ml

SMARCA4/SNF2 beta/BRG1  抑基因SNF2β抗體 規格: 0.2ml

ANKRD42  錨蛋白重復結構域蛋白42抗體 規格: 0.2ml

NeuN  神經元核抗原抗體 規格: 0.1ml

CK1  細胞角蛋白1抗體 規格: 0.1mlGoat Anti-Mouse IgM/FITC  FITC標記的羊抗小鼠IgM 規格: 0.3ml

Mouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的小鼠抗豚鼠IgG 規格: 0.1mlFOXO4  叉蛋白O4抗體 規格: 0.2ml

MARCH3  膜相關環指蛋白3抗體 規格: 0.2ml

Sortilin/NTR3/Gp95  神經降壓素受體3抗體(糖蛋白95) 規格: 0.2ml

1瓶 NCI-H23細胞株 NCI-H23 低溫運輸和保存

麥芽浸膏瓊脂 Malt Extract Agar 200g

5mL 素 B 硫酸鹽 Polymyxin B Sulfate Solution 4℃避光保存

2 ug pET-38b(+) pET-38b(+) 低溫運輸,-20℃保存

 


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