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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第10年

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M199 培養(yǎng)基

參  考  價(jià):1 - 560 /盒
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)

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    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    經(jīng)銷商

  • 所在地

    上海市

更新時(shí)間:2025-05-30 16:41:22瀏覽次數(shù):211次

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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
保存條件 2-8℃、避光 貨號(hào) GOY-XP5173
產(chǎn)品規(guī)格 500ml 用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)
M199 培養(yǎng)基早期合成培養(yǎng)基:含50余種成分(包括嘌呤、嘧啶、激素前體等),常用于病毒培養(yǎng)、疫苗生產(chǎn)、雞胚細(xì)胞研究及某些特殊細(xì)胞系的維持。

M199 培養(yǎng)基


產(chǎn)品名稱

M199 培養(yǎng)基

貨號(hào)

GOY-XP5173

規(guī)格

500ml

用途

僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

產(chǎn)品介紹

1950年,Morgan成功研制出具有確定化學(xué)成分的細(xì)胞培養(yǎng)液,即M-199,主要用于雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長期培養(yǎng)。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細(xì)胞,并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。

 

M199 培養(yǎng)基

放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸(儲(chǔ)存條件2-8℃ 避光儲(chǔ)存)產(chǎn)品保質(zhì)期12個(gè)月。


M199 培養(yǎng)基

M199 培養(yǎng)基

細(xì)胞復(fù)蘇?:

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞,迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后,將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?:

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液,輕輕漂洗細(xì)胞,以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片,重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?:

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí),進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液,輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后,加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液,轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清,加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記,放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?:

選擇對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心,棄上清。

加入適量的凍存液(如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO),輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中,標(biāo)記后放入程序降溫盒,再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

M199 培養(yǎng)基

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

M199 培養(yǎng)基

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