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原代人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

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更新時間:2025-04-21 15:59:16瀏覽次數(shù):66次

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生化檢測試劑盒
科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
組織來源 皮膚組織 貨號 GOY-01X1044
產(chǎn)品規(guī)格 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁 用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
原代人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:MT-2白血病HPAF-II (人胰腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)SNU-387 (人肝癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)8305C (人甲狀腺癌細(xì)胞(未分化)) (STR鑒定正確)MM.1S (人IgA- 骨髓瘤細(xì)胞)Daoy (人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確)BHT101 (人甲狀腺癌細(xì)胞(未分化)) (STR鑒定正確)CAL-62 (人甲狀腺癌細(xì)胞(未分化)

原代人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

細(xì)胞簡介:

人表皮角質(zhì)形成分離自皮膚組織;表皮位于動物皮膚的外層,由胚胎時期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞是一種能合成角質(zhì)蛋白的上皮細(xì)胞,此類細(xì)胞為表皮的主體,由表皮深層始逐漸增殖、分化,并在成為角化的角質(zhì)細(xì)胞中,細(xì)胞核與細(xì)胞器wan全消失,細(xì)胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對機(jī)體尚有保護(hù)作用,故不必在洗擦身體時用力搓擦,使其過早脫失。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞主要分布于表皮基底層,在上皮程序性死亡后,細(xì)胞產(chǎn)生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞容易導(dǎo)致終末分化,不能充分增殖。角質(zhì)形成細(xì)胞最終產(chǎn)生角質(zhì)蛋白,在其向角質(zhì)細(xì)胞演變過程中,一般可以分為四層,即基底層、棘層、顆粒層以及角質(zhì)層。有人把前三層或前二層稱為生發(fā)層或馬爾匹基層。此外,在某些部位,特別在掌跖部位,角質(zhì)層下方還可見到透明層。
方法簡介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞先中性dan白酶消化、后yi蛋白酶-膠原酶混合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人表皮角質(zhì)形成經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


原代人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞


產(chǎn)品名稱

原代人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

英文名稱

Human Epidermal Keratinocyte Cells

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X1044

組織來源

皮膚組織

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣

培養(yǎng)信息:

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

 


原代人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞



原代人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,

2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,

3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,

4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會飄起來,

5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。原代人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

原代人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

1、您收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作:

取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。

2、細(xì)胞傳代:

1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。

3、細(xì)胞凍存:

1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;

4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。

4、細(xì)胞復(fù)蘇:

1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;

3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

原代人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

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