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原代人臍帶血間充質干細胞

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    上海市

更新時間:2025-04-21 16:45:37瀏覽次數:96次

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科研細胞
原代細胞
細胞培養
組織來源 臍帶血 貨號 GOY-01X1183
產品規格 5×105Cells/T25培養瓶 細胞形態 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁 用途 僅供科研研究實驗
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原代人臍帶血間充質干細胞

細胞簡介:

人臍帶血間充質干分離自臍帶血;臍帶血是胎兒娩出、臍帶結扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。近十幾年的研究發現,臍帶血中含有可以重建造血和免疫系統的造血干細胞,可用于造血干細胞移植;因此,臍帶血已成為造血干細胞的重要來源。臍帶血中含有大量的干細胞,干細胞是生命的種子,它會分化成機體的各種細胞,結出各種不同的果實——血液細胞、神經細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體;這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數量,又可進一步分化為各種組織細胞,從而在組織修復等方面發揮積極作用。間充質干細胞(MSC)是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞。在不同的誘導條件下,可分化為多種造血細胞以外的組織細胞,并具有造血支持、免疫調節、組織修復等作用;目前,多用于風濕免疫疾病的治療。間充質干細胞(MSCs)是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細胞,存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細胞因子及生長因子,促進造血干細胞(HSC)的增殖與分化。MSCs還具有免疫調節、抗炎和組織修復作用,可減輕移植物抗宿主病(GVHD)及其他移植相關并發癥。
方法簡介:

公司實驗室分離的人臍帶血間充質干采用密度梯度離心法、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:

公司實驗室分離的人臍帶血間充質干經CD29、CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

 


原代人臍帶血間充質干細胞


產品名稱

原代人臍帶血間充質干細胞

英文名稱

Human Umbilical Cord Blood Mesenchymal Stem Cells

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

貨號

GOY-01X1183

組織來源

臍帶血

細胞形態

成纖維細胞樣

培養信息:

培養基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態最佳

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

 


原代人臍帶血間充質干細胞



原代人臍帶血間充質干細胞

1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,

2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預冷的PBS中,盡可能的除去結締組織等,

3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養瓶中,倒置于細胞培養箱中,

4) 2h后,培養瓶中注入2 mL內皮培養基,小心將培養瓶正置于培養箱,確保組織塊不會飄起來,

5) 每3d換液2mL,待細胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細胞融合達到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內皮細胞重新鋪瓶。原代人臍帶血間充質干細胞

原代人臍帶血間充質干細胞

1、您收到細胞后,請按照以下方法進行操作:

取出T-25cm2培養瓶,75%酒精擦拭培養瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置4-6小時或過夜,以穩定細胞狀態,然后換用新鮮培養液繼續培養或進行傳代。

2、細胞傳代:

1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)棄上清,沉淀細胞用12ml培養基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;

4)待細胞貼壁后,觀察培養結果,之后進行換液培養或傳代。

3、細胞凍存:

1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后輕輕吹打細胞使之脫落,再加入培養液終止消化,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)用適當量的凍存液(基礎培養基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細胞,并放置于凍存管中;

4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉入液氮中進行長期保存。

4、細胞復蘇:

1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2)將凍存管中的細胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養液5ml混勻細胞,然后將細胞懸液轉移至適當面積大小的培養皿中;

3)放置于37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;

4)第二天,換用新鮮培養基繼續培養。

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