干細(xì)胞的另一種培養(yǎng)方法
器械
顯微器械：眼科剪一把，直彎眼科鑷各一把，細(xì)結(jié)鑷一把，手術(shù)刀一把，針頭諾干
殺老鼠器械：手術(shù)剪一把，大鑷子一把，彎眼科鑷一把，組織鉗一把，50ml燒杯一個(gè)（錫紙包好）
另外：10ml離心管兩個(gè)，培養(yǎng)皿兩個(gè)，10ml的瓶子三個(gè)，小濾器兩個(gè)，硅膠板一塊，培養(yǎng)瓶蓋子諾干
貳。研究人員發(fā)現(xiàn)，Numb的PTB結(jié)構(gòu)域以一種非典型的模式特異性識(shí)別Pon中的重復(fù)模序，這種多位點(diǎn)結(jié)合誘導(dǎo)該復(fù)合物發(fā)生液-液相變（liquid-liquid phase transition， LLPT）分離，在體外和細(xì)胞中能夠自發(fā)組裝形成致密的無(wú)膜液相結(jié)構(gòu)。而這種相變液滴可以被Numb PTB的競(jìng)爭(zhēng)多肽破壞并去組裝。在這些分相的液滴中，Numb/Pon復(fù)合物高度濃縮，但同時(shí)又與周?chē)芤褐械蜐舛鹊腘umb/Pon蛋白存在快速的動(dòng)態(tài)交換，這一現(xiàn)象與在體數(shù)據(jù)高度吻合。
研究人員進(jìn)一步證明Pon作用于Numb-Notch信號(hào)通路上游以促進(jìn)NB的分化，而對(duì)Numb/Pon復(fù)合物相變過(guò)程的干擾將破壞果蠅神經(jīng)干細(xì)胞不對(duì)稱(chēng)分裂時(shí)Numb的底部定位過(guò)程，并影響其不對(duì)稱(chēng)分離和對(duì)Notch信號(hào)通路的抑制，Z終形成腫瘤樣NB增生。
專(zhuān)家表示，這項(xiàng)研究不僅揭示了Numb/Pon復(fù)合物調(diào)控神經(jīng)干細(xì)胞不對(duì)稱(chēng)分裂的分子機(jī)制，也提示相變可能廣泛地應(yīng)用于細(xì)胞極化過(guò)程，即這種蛋白相互作用引起的相變可能是調(diào)控極性蛋白復(fù)合物在特定膜區(qū)域異位濃縮的一個(gè)普遍機(jī)理，這也為理解腫瘤的發(fā)生與轉(zhuǎn)移機(jī)制提供了一個(gè)新的視角。
這樣處理后，一般五天內(nèi)不用看它，第六天開(kāi)始，可以加入含20％FBS的DMEM
兩種方法比較，貼壁法的優(yōu)點(diǎn)在于時(shí)間較少，所用試劑少，不用出去離心，較少污染機(jī)會(huì)。
但據(jù)我們實(shí)驗(yàn)室的經(jīng)驗(yàn)，貼壁法較消化法爬出干細(xì)胞的時(shí)間較長(zhǎng)，且細(xì)胞不大純，活性較差。戰(zhàn)友們可以根據(jù)自己的需要選選擇。
對(duì)照品    無(wú)味氯霉素A晶型    100mg    對(duì)照品
對(duì)照品    無(wú)味氯霉素B晶型    100mg    對(duì)照品
對(duì)照品    哌拉西林    200mg    對(duì)照品
對(duì)照品    頭孢哌酮    200mg    對(duì)照品
對(duì)照品    頭孢唑啉    200mg    對(duì)照品
對(duì)照品    克林霉素    100mg    對(duì)照品
對(duì)照品    氯唑西林    200mg    對(duì)照品
對(duì)照品    平陽(yáng)霉素    8mg     對(duì)照品
干細(xì)胞