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動物血清elisa試劑盒濃度須優化

閱讀:129發布時間:2018-2-23

動物血清elisa試劑盒zui常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、穩定,在去除洗滌過程中的一些非特異結合上很有用。但它們只在存在時起作用,因為很容易被洗掉。因此所有洗滌液中也必須添加封閉液。請勿使用高濃度(正常濃度為0.01-0.1%),它會降低特異結合,產生假陰性。另一個選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封閉液,后者可協助洗滌過程中的封閉。
蛋白封閉液則有所不同,是*的。它們與開放位點結合并封閉,同時穩定與微孔板結合的抗原分子。常用的蛋白封閉液包括牛血清白蛋白(BSA)、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。血清組分的內在多樣性可使它有效攔截許多不同類型的分子相互作用。不過,它的缺點在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。解決這個問題的一種方法是使用雞或魚的正常血清。
我們通常會follow師兄師姐留下來的操作步驟,但是如果試劑稍有不同,則可能需要優化抗體的量。記住,非特異的抗體結合會增加背景。為了防止這一點,切勿使用過多的一抗或二抗。
檢測試劑要適量
動物血清elisa試劑盒另一點也很顯而易見:切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高,或者未正確稀釋,則會導致高背景。也不要顯色過度,如有必要,優化一下何時應加入終止液。
如果您的ELISA試劑盒操作中不幸地遇到了高背景,那么也無需太擔心,依次查看ELISA系統中的組分,并排除可能存在的問題。悉心優化,相信很快就會有漂亮的結果。
 NCK銜接因子蛋白2IgG    小鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)
 Nemo樣激酶IgG    小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)
 NFAM1IgG    小鼠糖原合成酶激酶(GSK)
 NFkB誘導的激酶IgG    小鼠糖皮質類固醇受體(GR)
 NF-κB活化激酶IgG    小鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)
 NK細胞表面抑制性受體CD94IgG    小鼠糖蛋白130(gp130)
 NK細胞受體/自然殺傷細胞活化性受體IgG    小鼠碳酸酐酶2(CA-2)
 NK細胞受體2A/自然殺傷細胞活化性受體2AIgG    小鼠碳酸酐酶(CA)
 NK細胞受體2C/自然殺傷細胞活化性受體2CIgG    小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)
 NK細胞受體BY55IgG    小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒胞質IgG(MPO-ANCA IgG)
動物血清elisa試劑盒

 


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