ELISA試劑盒頂用ELISA檢測時（以檢測弓漿蟲IgM為例），用無特異抗體的血清稀釋陽性血清繪制規范曲線，選擇的稀釋度應很簡單差異陽性和暗影成果的稀釋度。每次實驗均應同時運用陰性對照血清，可選擇強陽性的血清作為規范對照血清，并可自己設定其為100單位（免疫酶單位-EIU）。這樣每次實驗均參閱陽性血清成果斷定每份血清的相對抗體水平，其核算公式如下：標本值-陰性對照值 陽性對照值-陰性對照值
抗體水平（樣本）=（規范值-陰性對照值）/（陽性對照值-陰性對照值）×EIU
用在450nm檢測的吸光度核算，zui終的值為EIU。
ELISA試劑盒如果國內或上的規范抗體和檢測辦法，那么所用的參閱血清應與規范血清對照實驗進行規范化，但如果所用的檢測辦法不同，規范化時就存在不同，不同的辦法檢測出的成果不能反映出參閱血清和規范血清之間的不同。
自己制備的規范參閱血清應保證質量，并要有滿足的血清，小量分裝存儲與-20℃，或凍干存儲。規范血清檢測的吸光度值應保證在一定范圍內，以便檢測每次實驗的吸光度值的變化。
