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ELISA試劑盒在實驗中常見問題的詳解

閱讀:51發布時間:2018-1-15

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1 質控血清的運用
衛生部臨床查驗中心制備的乙肝標志物質控血清,能夠在-20℃堅持半年定值不變。冰凍狀況消融運用時,應先混勻,未用完部分可在4℃保存5天。不宜重復冰融或自行分裝。展開某項查驗的室內質控工作需要的質控血清,一般按3-6個月用量預備。克己的不定值質控血清,在一批質控血清將用完之前,需預備下一批質控血清。質控血清要求功能安穩,較*內效價不變,其理化性質應與病人樣本附近,這樣才能有效地起到監測效果。
2 臨界值質控血清
質操控血清分定值和不決值兩種。如只用一份質控血清定值,一般定在正常值與異常值接壤點上,定性測守時處于弱陽性水平,稱為臨界值。乙肝標志物臨界值的制定,應按臨床要求,為臨床供給一致的判別弱陽性的規范。 
臨界值質控血清能夠作為試劑盒中的陽性對照品和陰性對照品以外的第三個對照品,它能夠活絡地反映出試劑盒的檢出水平,保證弱陽性反響的標本不漏檢。
3 質控血清的制備
ELISA試劑盒每個實驗室能夠依據自己的條件,選用臨床中心供給的質控血清,或按以下辦法自己制備本室運用的質控血清(以乙肝質控血清為例)。
1) 搜集新鮮的無溶血、無黃疸、無細菌污染的陽性血清。
2) 56℃加熱10小時來活。
3) 離心或過濾除掉沉積。
4) 用10%的小牛血清或正常人血清(PBS緩沖液)將搜集的血清稀釋至所需的濃度。如能用正常的人血清稀釋更好,因其成份更接近于檢測標本。
5) 抽濾除菌。按一次運用的量分裝小安瓿,封口,20℃保存備用。不行重復凍融。
被檢物要求檢出的水平常被認為是質控血清應挑選的水平。如果該實驗還有其它要求,則應加所要求濃度的質控物。
6) 標定含量。20-30次測定成果刪除>±2SD數據的均值作為靶值,并與已知定值血清比照測定

 


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