試驗類型
ELISA試劑盒有多種類型，不過它們都有一個一起特色，就是進行抗原捕獲。一般捕獲方式包含將抗原吸附到微孔板或許用微孔板上的抗體進行捕獲。
一般人們運用雙抗夾心法進行ELISA試驗，雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測抗體之間，這種方法既活絡(luò)又有用，受到了許多研究者的喜愛。不過有時候雙抗夾心法并不是好的挑選，例如有時候抗原特別小讓兩個大抗體難以附著，又或許抗體只要一個抗體結(jié)合位點。
在上述情況下，競賽性ELISA就更為適用，這種方法是選用帶符號的純化抗原與樣本中無符號的抗原進行競賽，以結(jié)合捕獲抗體。
檢測方式
現(xiàn)在檢測ELISA試劑盒有許多途徑，我們能夠依據(jù)自己的偏好進行挑選。一般ELISA檢測的是酶促反響的可溶性產(chǎn)物，抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶（例如一般運用的辣根過氧化物酶HRP），而反響系統(tǒng)中添加有相應(yīng)的底物（如3，3-二氨基聯(lián)苯胺DAB）。
這種酶促反響生成具有特征性的色彩，能夠通過分光光度計進行檢測，堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶能夠結(jié)合在一抗上，也能夠結(jié)合在二抗上，還能夠運用鏈霉親和素符號的酶與親和素符號的一抗結(jié)合。此外ELISA的成果檢測還包含放射性檢測、熒光檢測、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢測等。
抗體類型
單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于ELISA，實際上有時候二者結(jié)合效果更好。例如，關(guān)于雙抗夾心法而言，用多抗進行捕獲而單抗進行檢測有時更有協(xié)助。多抗能夠保證捕獲一切抗原，隨后單抗再特異性檢測具有特定抗原表位的抗原。
雙抗夾心法ELISA中捕獲抗體與檢測抗體（不管多抗仍是單抗）的配對很有考究。我們不期望捕獲抗體與檢測抗體競賽抗原上的同一位點，為此我們就需求保證捕獲抗體和檢測抗體所辨認(rèn)的抗原表位不存在重疊。
如果捕獲抗體和檢測抗體之間發(fā)生了沖突，就會對試驗成果產(chǎn)生較大影響。要防止這一問題，我們能夠挑選購買“matched pair"的捕獲/檢測抗體對，這些打包在一起的抗體是商家經(jīng)過驗證才引薦的好組合。
穿插反響
如果抗體間發(fā)生沖突或穿插反響就會影響整個試驗的特異性。其間抗體來歷所帶來的兼容性就是穿插反響的一個要素。雖然現(xiàn)在購買源自動物的抗體越來越簡單，我們?nèi)杂斜匾_認(rèn)一下是否會產(chǎn)生穿插反響的問題。
在用雙抗夾心法進行ELISA試劑盒檢測時，檢測用的二抗有必要特異性針對檢測一抗，而不能與捕獲抗體起反響。如果檢測用二抗與捕獲抗體結(jié)合，試驗特異性就會大打折扣。一般我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗，來防止上述問題。
