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公司動(dòng)態(tài)

ELISA試劑盒研究實(shí)驗(yàn)條件選擇的重要性

閱讀:149發(fā)布時(shí)間:2018-1-4

ELISA試劑盒條件挑選有以下幾種方式:
(1) 固相載體的挑選:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其方式可所以凹孔平板、試管、珠粒等?,F(xiàn)在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不論何種載體,在運(yùn)用前均可進(jìn)行挑選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反響,調(diào)查其顯色反響是否均一性,據(jù)此判明其吸附功能是否杰出。
(2) 包被抗體(或抗原)的挑選:將抗體(或抗原)吸附在固相載體外表時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,小鼠ELISA試劑盒時(shí)刻及其蛋白量也有必定影響,一般多選用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它實(shí)驗(yàn)條件相一起,調(diào)查陽性標(biāo)本的OD值。挑選OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。關(guān)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說一般為1~10μg/ml。
(3) ELISA試劑盒酶符號(hào)抗體作業(yè)濃度的挑選:首先用直接ELISA法進(jìn)行開始效價(jià)的滴定(見酶符號(hào)抗體部份)。然后再固定其它條件或采納“方陣法"(包被物、待檢樣品的參閱品及酶符號(hào)抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)體系里地滴定其作業(yè)濃度。


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