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如何更好的做ELISA試劑盒實驗標曲

閱讀:376發布時間:2018-1-18

ELISA試劑盒試驗標曲做欠好是什么原因,由于剛觸摸elisa試驗,仍是歸于新手,研討大鼠干擾素相關目標的試驗,做完大鼠γ干擾素ELISA試驗后反響規范曲線的梯度都欠好。剛加完顯色劑的時分梯度還算顯著,可是顯色比較淺,跟著時刻延伸(大概6、7分鐘)今后梯度就不顯著了。停止反響后測得的值梯度就沒有了。
ELISA試劑盒試驗標曲做欠好是什么原因:
1、剛加完顯色劑時梯度顯著:顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的。

2、酶濃度太高,導致zui終顯色結果都是高的。
3、包被-酶標體系不匹配或許酶標的非特異反響太強,或許酶標儀讀數規模不行,
4、樣本中有能夠催化底物的物質,沒洗下來。
5、主張:包被、酶標重新做梯度,先用較低的濃度把梯度探索好,然后再優化靈敏度,zui終調出所需的靈敏度、線性規模。
6、有條件的話,能夠把酶免的蛋白體系移植到板式化學發光上,加完底物三分鐘讀數。
7、蛋白體系靈敏度夠的話,顯色十分鐘就差不多了。
8、
ELISA試劑盒酶是自己標的這種狀況的,HRP份額不要太高。


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