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ELISA試劑盒競爭抑制方法的建立

閱讀:209發布時間:2018-4-2

ELISA試劑盒試驗采用改良過碘酸鈉法將辣根過氧化物酶標記在抗體上,標記完后取上清用Sephedex G200凝膠層析進行純化,洗脫液為0.2mol/LpH7.4的PBS,流速為15mELISA試劑盒l/h,分步收集,每支3ml,以紫外分光光度計測A280吸光度值,以洗脫體積為橫坐標,吸光值為縱坐標做圖,ELISA試劑盒收集*峰即為酶標抗體峰。
ELISA試劑盒標記完后用紫外分光光度計在分別在280nm、及403nm處測定酶標記物的A值,計算免疫球蛋白量、摩爾比值、酶結合率以及標記率。包被用緩沖液及zui適包被抗原濃度的優化包被緩沖液的優化
包被抗原時,為了得到的包被效果,我們采用了碳酸鹽緩沖液(50mM ph9.6 )、磷酸鹽緩沖液(50mMph7.6)、以及TRIS鹽酸緩沖液(50 mM ph7.6)三種緩沖液作為包被液,抗原包被濃度為5ug/ml,及2.5ug/ml,酶標抗體工作濃度為1:400及1:300,ELISA試劑盒用自動酶標儀小鼠ELISA試劑盒分析,選擇的包被緩沖液系統。同時為了保證緩沖液能夠*保存,在包被液中添加了0.01%的硫柳汞作為防腐劑。


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