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ELISA試劑盒試驗中呈現負值時的處理辦法

閱讀:202發布時間:2018-4-7

A:1)ELISA試劑盒血清中有些細胞因子的檢出率很低,血清中又富含許多大分子雜蛋白,在血清濃度較高時簡單隱瞞抗原的表位,因此在測血清原液時常呈現負值。這即是在咱們的闡明書中主張檢查血清時做1:2稀釋的因素。除TGF-B1、sICAM-1、MMP-9、TIMP-1等要做高倍稀釋外,其它一些細胞因子都要做1:2稀釋(這在咱們的闡明書中有提示)。做法是:先在樣本孔中加50ul試劑稀釋液(試劑盒中已備),再加50ul樣本。求出樣本含量后需求乘上稀釋倍數2。
2)ELISA試劑盒試驗假如按上訴辦法處理后檢查仍有負值,則處理數據時可以采納2個辦法:
a:規范曲線只取規范曲線的下面4~5個點,即125,62.5,31.25,15.625,7.8,0,或62.5,31.25,15.625,7.8、3.9、0。原則是把樣本的OD值全包含,規范曲線又能至少有4個點。也即是把規范曲線的下端(即樣本含量會集的這一段)擴大,求出的數據更牢靠。
b:ELISA試劑盒人為的把“0”pg/ml點OD值下降。原則是把“0”OD值降到比zui低的樣本OD略低一點,盡可能使樣本的含量滿是正值,一起確保變化“0”OD值后的規范曲線的相關系數(r)>0.98。這樣變化后,通常樣本都能得到數據,低的樣本出來了,高的樣本含量也會高一些。因為計算時是相對含量的對比,所以不會影響ELISA試劑盒試驗計算成果。
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