盡管新腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)染試劑在不斷涌現(xiàn)，一代更比一代強(qiáng)，但面對(duì)原代細(xì)胞，它們的效果仍然不盡如人意。于是，日本名古屋大學(xué)的研究人員做了一個(gè)大膽的嘗試，將兩種的轉(zhuǎn)染試劑結(jié)合使用，竟然取得了不錯(cuò)的效果。下面，我們就來看看他們是怎么做的。

目前，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑被廣泛使用，因?yàn)樗鼈兪褂煤啽悖膊恍枰厥庠O(shè)備。不過，這些試劑在原代細(xì)胞上的轉(zhuǎn)染效果不佳。為了解決這個(gè)問題，研究人員決定組合使用Lipofectamine LTX和FuGENE HD這兩種試劑，來轉(zhuǎn)染原代成纖維細(xì)胞和成肝細(xì)胞。

研究人員從小鼠胚胎中分別獲取了原代成纖維細(xì)胞和成肝細(xì)胞。他們將pRL-CMV質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞內(nèi)，以檢驗(yàn)轉(zhuǎn)染效率。pRL-CMV來自Promega公司，它在CMV啟動(dòng)子的控制下組成型表達(dá)海腎熒光素酶。因此，利用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測系統(tǒng)可以確定轉(zhuǎn)染效率。

當(dāng)然，轉(zhuǎn)染效率的提高也不能以細(xì)胞死亡為代價(jià)。于是，研究人員又利用Promega的CellTiter-Glo細(xì)胞活力檢測系統(tǒng)來評(píng)估細(xì)胞活力。他們通過光度計(jì)測量儀來測定相對(duì)光強(qiáng)度（RLU），以反映熒光素酶活性或細(xì)胞活力。

研究結(jié)果表明，Lipofectamine LTX和FuGENE HD的結(jié)合使用提高了原代成纖維細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。另外，Lipofectamine LTX在購買時(shí)還附帶了一種Plus試劑。根據(jù)說明，在轉(zhuǎn)染過程中添加Plus試劑可提高轉(zhuǎn)染效率。研究人員也嘗試著添加Plus試劑，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染效率的確有上調(diào)。

之后，研究人員又將這種組合應(yīng)用在原代成肝細(xì)胞上。他們發(fā)現(xiàn)，盡管轉(zhuǎn)染效率有所提高，但是不如原代成纖維細(xì)胞那么顯著。此外，與單用FuGENE HD相比，試劑組合的使用降低了細(xì)胞活力。為此，他們優(yōu)化了實(shí)驗(yàn)，提高了細(xì)胞密度，使得結(jié)果改善。

作者指出，腫瘤細(xì)胞脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移取決于多個(gè)因素，如脂質(zhì)體/DNA復(fù)合物的凈電荷和結(jié)構(gòu)。他們推測，Lipofectamine LTX和FuGENE HD的組合也許優(yōu)化了復(fù)合物的形成，故提高了原代細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。不過。這些試劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)并未公布，因此機(jī)制仍無法獲知。
20mg/支    Compound K    人參皂苷CK    HPLC≥98%        
20mg/支    (−)-Gallocatechin gallate；GC    沒食子兒茶素    HPLC≥98%       
20mg/支    (−)-Catechin gallate；CG    兒茶素沒食子酸酯    HPLC≥98%     
0001-9503    對(duì)照品    醋酸*    含量測定        50mg
100002-199504    對(duì)照品    *    檢查        500mg
100004-198102    對(duì)照品    *    含量測定        50mg
0005-9402    對(duì)照品    苯丁酸氮芥    含量測定        50mg
100006-200504    對(duì)照品    苯甲酸雌二醇    含量測定        100mg
100008-199404    對(duì)照品    *    含量測定        50mg
100010-200507    對(duì)照品    *    含量測定        50mg
腫瘤細(xì)胞