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ATCC細(xì)胞污染的清除

時間:2018-5-11閱讀:309
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培養(yǎng)ATCC細(xì)胞一經(jīng)污染,多數(shù)較難處理。如果污染細(xì)胞價值不大,宜棄之;在尋找原因后*消毒操作室,復(fù)蘇或重新購置細(xì)胞,再培養(yǎng)。

若污染細(xì)胞價值較大,又難于重新得到,可采取以下辦法清除。

一、細(xì)菌和真菌的清除

1、使用抗生素

抗生素對殺滅細(xì)菌較有效。聯(lián)合用藥比單獨用藥效果好。預(yù)防用藥比污染后再用藥效果好。預(yù)防用藥一般用雙抗生素,污染后清除用藥需采用大于常用量5~10倍的沖洗法,于加藥后作用24~48小時,再換常規(guī)培養(yǎng)液。此法在污染早期有效。

二、支原體的清除

1、用MRA處理

用MRA(Mycoplasma Removal Agent)處理細(xì)胞,每4天換一次液,連續(xù)處理15天以確保細(xì)胞純潔健康,效果好.

2、用清洗純化法清除支原體污染的方法

細(xì)胞營養(yǎng)馴化→細(xì)胞群的篩選→細(xì)胞清洗→反復(fù)離心洗滌

其原理是利用離心力、細(xì)胞、微生物質(zhì)量和懸液的浮力差達(dá)到清除支原體的目的。由于支原體個體小且除發(fā)酵支原體外多為細(xì)胞外寄生,所以通過反復(fù)洗滌細(xì)胞和低速離心換液使其中潛在的支原體數(shù)量降低限。

如結(jié)合敏感抗生素的抑殺作用,可達(dá)到更好的效果。

3、藥物輔助加溫處理

先用藥物處理后,再將污染的組織培養(yǎng)物放在41℃培養(yǎng)18小時,可殺死支原體,但對ATCC細(xì)胞有不良影響。

4、使用支原體特異性血清

用5%的兔支原體免疫血清可去除支原體污染,因特異抗體可抑制支原體生長,故經(jīng)抗血清處理后11天即轉(zhuǎn)為陰性,并且5個月后仍為陰性。但此法比較麻煩,不如用抗生素方便、經(jīng)濟。

Phenindione 250mg 苯茚二酮標(biāo)準(zhǔn)品 1983/12/5

Phenolphthalein 250mg *標(biāo)準(zhǔn)品 1977/9/8

250mg DL-α-生育酚標(biāo)準(zhǔn)品 1959/2/9

Prednisone 250mg *標(biāo)準(zhǔn)品 1953/3/2

Mephenytoin 250mg 美芬妥因標(biāo)準(zhǔn)品 1950/12/4

Alitame 250mg 阿力甜標(biāo)準(zhǔn)品

250mg 克利溴銨相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品

Talbutal CIII DISCONTINUED 250mg 他布比妥標(biāo)準(zhǔn)品

20mg 辛基三嗪酮相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 乙基己基三嗪酮相關(guān)物質(zhì)C
ATCC細(xì)胞

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