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ATCC細(xì)胞
檢測試劑盒
elisa檢測試劑盒
分子生物學(xué)
培養(yǎng)基
生化試劑
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒
質(zhì)粒
PCR試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)
生化檢測試劑盒
PCR檢測試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)品

人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞運輸和保存

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人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞介紹
WERI-Rb-I細(xì)胞株是1974年R.M. McFall 和 T.W. Sery建立的兩株人眼癌細(xì)胞系中的一株。 細(xì)胞能在Difco Bacto-Agar中存活但不形成克隆。 掃描電鏡顯示在表面囊泡,板狀偽足和微絨毛在數(shù)量上和頻率上的改變。 細(xì)胞分化研究,腫瘤治療的動物模型和生化評價都涉及這株細(xì)胞。
細(xì)胞特性
1) 來源:視網(wǎng)膜
2) 形態(tài):圓形細(xì)胞聚集成葡萄狀,懸浮生長
3) 含量:>1x106 
4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包

運輸和保存

1.使用含有胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。

2.收到細(xì)胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入推薦使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

3.收到細(xì)胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們。 

細(xì)胞用途:僅供科研使用。
細(xì)胞接收后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 將T25瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)基離心后,去上清,添加6ml*培養(yǎng)基,加入新的T25瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
4) 如果細(xì)胞長滿80%請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代.                    
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。

2) 人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法

1. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5比例分到新皿中或者瓶中,補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml,放入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。

下面T25瓶為例;

1,細(xì)胞凍存時,取上清,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min ,1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

注意事項:

1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。

2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。

3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。

4.人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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