少妇无码精品12P_99久久精品国产免费看_色.www_国产黄a三级三级三级看三级黑人_亚洲AⅤ无码一区二区波多野_久久123

上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年

13585831301

當(dāng)前位置:首頁   >>   資料下載   >>   大鼠肺泡巨噬細(xì)胞技術(shù)參數(shù)

ATCC細(xì)胞
檢測試劑盒
elisa檢測試劑盒
分子生物學(xué)
培養(yǎng)基
生化試劑
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒
質(zhì)粒
PCR試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)
生化檢測試劑盒
PCR檢測試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠肺泡巨噬細(xì)胞技術(shù)參數(shù)

時(shí)間:2018-4-17閱讀:104
分享:
  • 提供商

    上海莼試生物技術(shù)有限公司
  • 資料大小

    28.9KB
  • 資料圖片

  • 下載次數(shù)

    78次
  • 資料類型

    JPG 圖片
  • 瀏覽次數(shù)

    104次
點(diǎn)擊免費(fèi)下載該資料

大鼠肺泡巨噬細(xì)胞介紹
NR8383 (正常大鼠,1983年)來源于肺灌洗時(shí)的正常大鼠肺泡巨噬細(xì)胞。細(xì)胞在gerbil肺細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)液存在下培養(yǎng)了大約8-9個(gè)月。隨后,不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個(gè)細(xì)胞克隆并亞克隆NR8383細(xì)胞,并三次用軟瓊脂亞克隆。細(xì)胞表現(xiàn)出巨噬細(xì)胞的特性,吞噬酵母多糖和銅綠,非特異性脂酶活性,F(xiàn)c受體,氧化降解;分泌IL-1, TGF-β和IL-6,可重復(fù)地響應(yīng)外源生長因子。NR8383細(xì)胞響應(yīng)博萊霉素,分泌TGF-β前體。在博萊霉素刺激下,TGF –β mRNA表達(dá)也上升。細(xì)胞對(duì)內(nèi)毒素敏感。1-10 鈉克/毫升的LPS水平抑制增生達(dá)50%。 即使達(dá)到0.001毫克/毫升的水平,LPS抑制還是無毒且在后續(xù)過程中可逆的。NR8383細(xì)胞株提供了高響應(yīng)的肺泡巨噬細(xì)胞的均一來源,可以用于體外研究巨響細(xì)胞相關(guān)活性。
 
細(xì)胞特性
1) 來源:肺;巨噬細(xì)胞 
2) 形態(tài):巨噬細(xì)胞,半懸浮生長
3) 含量:>1x106 個(gè)/mL
4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
 
運(yùn)輸和保存

可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式

(1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;

(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

(3)收到細(xì)胞后請(qǐng)拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請(qǐng)及時(shí)拍照與我們。

細(xì)胞接收后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2) 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) T25瓶中的培養(yǎng)基取出離心后,去上清,添加6ml新的*培養(yǎng)基,重新加入原T25培養(yǎng)瓶。
4) 如果細(xì)胞長滿90%請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用本公司附帶的*培養(yǎng)基。
 
大鼠肺泡巨噬細(xì)胞細(xì)胞用途:僅供科研使用。
                       
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;胎牛血清(熱滅活),15%;L-谷氨酰胺,2mM;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 將上清取出,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出,和上清一起在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。

下面T25瓶為類;

1,細(xì)胞凍存時(shí),取出上清,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
 

注意事項(xiàng):

1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。

2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。

3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。

4.大鼠肺泡巨噬細(xì)胞所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 日韩福利| 日韩国产一区二区 | 亚洲精选免费 | 国产暴力强伦轩1区二区小说 | 久久国产精品成人无码网站 | 欧美性开放情侣网站 | m麻豆传媒映画 | 91tv官网精品成人亚洲 | 久久久无码精品成人A片小说 | 日本丰满熟妇VIDEOS | 国产精品影视在线 | 国产精品极品美女自在线观看免费 | 亚洲第一男人天堂 | 亚洲综合视频在线播放 | 国产一级黄色录像片 | 狠狠综合久久久久综合网小蛇 | 免费追剧网址 | 99久久精品免费观看国产 | 操操操操网 | 中国老妇女50xxxxhd | 免费观看作爱视频网站 | 少妇高潮av久久久久久 | 国产精品久久久久无码av | 让少妇爽到高潮视频 | 大地资源网更新免费播放视频 | 四虎地址 | 亚洲手机在线播放 | 亚洲呦女专区 | 欧美日韩精品一区二区三区四区 | 成人黄网视频在线观看 | 亚洲aⅴ久久精品蜜桃小仓由菜 | 色综合伊人丁香五月桃花婷婷 | 色综合伊人丁香五月桃花婷婷 | 久久久久久草 | 亚洲不卡在线视频 | 青草久久精品 | 久久夜色精品国产欧美 | 在线观看视频高清 | 1769在线视频| 公玩弄年轻人妻HD | 91视频.www|