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上海莼試生物技術有限公司
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細胞培養維持其多能性的奧秘

時間:2017/10/31閱讀:201
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 蛋白質之間的相互作用加強細胞培養間的相互,維持干細胞的多能性。對于胚胎干細胞而言,與其周圍細胞保持接觸是至關重要的。中國學者李棟等人發現了有助于細胞接觸生長并能保證他們維持其多能性的一個調控網絡。首先,這個課題組用一些化合物(蛋白激酶或者信號分子的抑制劑)對胚胎干細胞進行處理,篩選出對胚胎干細胞多能性有影響的化合物。 他們發現Blebbistatin 能夠刺激胚胎干細胞分離,其克隆形態變得扁平,而且擴散成為單個細胞狀態。Blebbistatin還能夠降低維持干細胞多能性的轉錄因子的活性,促進干細胞早期分化標志物 Lamin A/C 的增加。

    以往研究發現,只要有適宜的培養條件,人類胚胎干細胞就可以無限的分裂增殖而不發生分化。研究人員已經發現了一些維持這類細胞需要的條件,比如一些細胞因子:bFGF、TGF-β等。這些因子能夠穩定轉錄因子,其中SOX2、OCT4和NANOG一起可以抑制胚胎干細胞分化。胚胎干細胞也需要同伴,他們互相擁擠在一起形成緊密的克隆,細胞之間相互密切。這種克隆形態是*的。研究者利用這一特性用來作為來鑒定從分化的細胞重新誘導成為干細胞的指標之一,而單個的細胞往往容易死亡。李棟等人著手研究細胞之間的這種緊密怎樣使胚胎干細胞維持其多能性。

    Blebbistatin抑制肌球蛋白(NMMII)的活性,后者有助于調控細胞的形態以及移動。在他們的研究中,發現只有NMMIIA影響細胞的多能性。他們進一步研究證實NMMIIA和另一個促進細胞相互粘附的膜蛋白Eadherin一起聚積于細胞與細胞的連接部位。這兩個分子的位置暗示他們之間有緊密的關系。NMMIIA有助于Ecadherin穩定在其所處的位置。當課題組人員利用RNAi技術降低NMMIIA的表達后,Ecadherin會離開其所處的細胞與細胞間連接部位而進入細胞質。長期抑制NMMIIA會降低E-cadherin的表達。

    在表面附有E-cadherin的培養基上,Blebbistatin能夠降低細胞粘附達20%以上,這表明NMMIIA使細胞粘附力更強。利用RNAi技術抑制Ecadherin后,會破壞抑制細胞分化的信號通路,降低SOX2,OCT4和NANOG 的表達,一些分化標志蛋白也會相應增加。NMMIIA和Ecadherin是很緊密,但是,李棟等人發現還有其它因子參與其中。抑制NMMIIA降低Ecadherin的水平是通過降低 Ecadherin的連接蛋白P120catenin的表達來實現的。細胞培養研究人員發現Ecadherin和P120處于一個相互促進的循環中,他們可以互相增強其表達水平。他們認為在信號網絡中的這種循環反饋能夠確保有足夠的Ecadherin 聚積在細胞與細胞的連接處。
*苷H    20mg    Tenacissoside H    191729-45-0
*苷G    20mg    Tenacissoside G    191729-43-8
甜菊雙糖苷A    20mg    Rebaudioside A    58543-16-1
甜菊苷    20mg    Stevioside    57817-89-7
甜橙黃酮; 5,6,7,3',4'-五甲氧基黃酮    20mg    Sinensetin    2306-27-6
甜茶苷    20mg    Rubusoside    64849-39-4
甜菜堿    20mg    Betaine    107-43-7
天仙子胺    20mg    Hyoscyamine    101-31-5
*    20mg    Gastrodin    62499-27-8
細胞培養

 

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