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細(xì)胞培養(yǎng)維持其多能性的奧秘

時(shí)間:2017/10/31閱讀:202
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 蛋白質(zhì)之間的相互作用加強(qiáng)細(xì)胞培養(yǎng)間的相互,維持干細(xì)胞的多能性。對(duì)于胚胎干細(xì)胞而言,與其周圍細(xì)胞保持接觸是至關(guān)重要的。中國(guó)學(xué)者李棟等人發(fā)現(xiàn)了有助于細(xì)胞接觸生長(zhǎng)并能保證他們維持其多能性的一個(gè)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。首先,這個(gè)課題組用一些化合物(蛋白激酶或者信號(hào)分子的抑制劑)對(duì)胚胎干細(xì)胞進(jìn)行處理,篩選出對(duì)胚胎干細(xì)胞多能性有影響的化合物。 他們發(fā)現(xiàn)Blebbistatin 能夠刺激胚胎干細(xì)胞分離,其克隆形態(tài)變得扁平,而且擴(kuò)散成為單個(gè)細(xì)胞狀態(tài)。Blebbistatin還能夠降低維持干細(xì)胞多能性的轉(zhuǎn)錄因子的活性,促進(jìn)干細(xì)胞早期分化標(biāo)志物 Lamin A/C 的增加。

    以往研究發(fā)現(xiàn),只要有適宜的培養(yǎng)條件,人類胚胎干細(xì)胞就可以無(wú)限的分裂增殖而不發(fā)生分化。研究人員已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了一些維持這類細(xì)胞需要的條件,比如一些細(xì)胞因子:bFGF、TGF-β等。這些因子能夠穩(wěn)定轉(zhuǎn)錄因子,其中SOX2、OCT4和NANOG一起可以抑制胚胎干細(xì)胞分化。胚胎干細(xì)胞也需要同伴,他們互相擁擠在一起形成緊密的克隆,細(xì)胞之間相互密切。這種克隆形態(tài)是*的。研究者利用這一特性用來(lái)作為來(lái)鑒定從分化的細(xì)胞重新誘導(dǎo)成為干細(xì)胞的指標(biāo)之一,而單個(gè)的細(xì)胞往往容易死亡。李棟等人著手研究細(xì)胞之間的這種緊密怎樣使胚胎干細(xì)胞維持其多能性。

    Blebbistatin抑制肌球蛋白(NMMII)的活性,后者有助于調(diào)控細(xì)胞的形態(tài)以及移動(dòng)。在他們的研究中,發(fā)現(xiàn)只有NMMIIA影響細(xì)胞的多能性。他們進(jìn)一步研究證實(shí)NMMIIA和另一個(gè)促進(jìn)細(xì)胞相互粘附的膜蛋白Eadherin一起聚積于細(xì)胞與細(xì)胞的連接部位。這兩個(gè)分子的位置暗示他們之間有緊密的關(guān)系。NMMIIA有助于Ecadherin穩(wěn)定在其所處的位置。當(dāng)課題組人員利用RNAi技術(shù)降低NMMIIA的表達(dá)后,Ecadherin會(huì)離開其所處的細(xì)胞與細(xì)胞間連接部位而進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。長(zhǎng)期抑制NMMIIA會(huì)降低E-cadherin的表達(dá)。

    在表面附有E-cadherin的培養(yǎng)基上,Blebbistatin能夠降低細(xì)胞粘附達(dá)20%以上,這表明NMMIIA使細(xì)胞粘附力更強(qiáng)。利用RNAi技術(shù)抑制Ecadherin后,會(huì)破壞抑制細(xì)胞分化的信號(hào)通路,降低SOX2,OCT4和NANOG 的表達(dá),一些分化標(biāo)志蛋白也會(huì)相應(yīng)增加。NMMIIA和Ecadherin是很緊密,但是,李棟等人發(fā)現(xiàn)還有其它因子參與其中。抑制NMMIIA降低Ecadherin的水平是通過(guò)降低 Ecadherin的連接蛋白P120catenin的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。細(xì)胞培養(yǎng)研究人員發(fā)現(xiàn)Ecadherin和P120處于一個(gè)相互促進(jìn)的循環(huán)中,他們可以互相增強(qiáng)其表達(dá)水平。他們認(rèn)為在信號(hào)網(wǎng)絡(luò)中的這種循環(huán)反饋能夠確保有足夠的Ecadherin 聚積在細(xì)胞與細(xì)胞的連接處。
*苷H    20mg    Tenacissoside H    191729-45-0
*苷G    20mg    Tenacissoside G    191729-43-8
甜菊雙糖苷A    20mg    Rebaudioside A    58543-16-1
甜菊苷    20mg    Stevioside    57817-89-7
甜橙黃酮; 5,6,7,3',4'-五甲氧基黃酮    20mg    Sinensetin    2306-27-6
甜茶苷    20mg    Rubusoside    64849-39-4
甜菜堿    20mg    Betaine    107-43-7
天仙子胺    20mg    Hyoscyamine    101-31-5
*    20mg    Gastrodin    62499-27-8
細(xì)胞培養(yǎng)

 

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