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上海莼試生物技術有限公司
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細胞培養樣品之裂解液用量

時間:2017/12/28閱讀:272
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對于細胞培養樣品:
1. 融解RIPA裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入PMSF,使PMSF的終濃度為1mM。
2. 對于貼壁細胞:去除培養液,用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞1-2秒后,細胞就會被裂解。
對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成50-100萬細胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
細胞培養裂解液用量說明:通常6孔板每孔細胞加入150微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到200微升或250微升。
農殘級N-甲基吡咯烷酮,1-甲基...    4L    甜味素(阿斯巴甜,天門冬酰苯丙氨...    CDGG-012027-04-5PAK    120mg/L于乙腈:水 1:1,5 x 2 ml
HPLC級N-甲基吡咯烷酮,1-...    4L    甜味素(阿斯巴甜,天門冬酰苯丙氨...    CDGG-012027-03-5PAK    234mg/L于乙腈:水 1:1,5 x 2 ml
HPLC級N-甲基吡咯烷酮,1-...    1L    甜味素(阿斯巴甜,天門冬酰苯丙氨...    CDGG-012027-03    234mg/L于乙腈:水 1:1,2 ml
HPLC級N-甲基吡咯烷酮,1-...    500ml    甜味素(阿斯巴甜,天門冬酰苯丙氨...    CDGG-012027-02-5PAK    390mg/L于乙腈:水 1:1,5 x 2 ml
細胞培養

 

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