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細(xì)胞培養(yǎng)難題的克星——小分子聚陽(yáng)離子

時(shí)間:2018/1/18閱讀:192
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細(xì)胞培養(yǎng)基因是具有遺傳效應(yīng)的 DNA 片段,基因治療是通過(guò)糾正患病細(xì)胞基因缺陷或者調(diào)控細(xì)胞內(nèi)特定蛋白因子的表達(dá)而發(fā)揮作用。但是人體內(nèi)含有 DNA 酶,單獨(dú)的 DNA 很容易被相應(yīng)的酶降解,因此需要基因載體將需要治療的基因包裹起來(lái),防止酶的降解;被包裹的基因到達(dá)細(xì)胞質(zhì)之后,這一基因載體需要將核酸分子釋放出來(lái),讓其表達(dá)。

高分子量聚陽(yáng)離子是目前應(yīng)用的基因載體之一,但其高細(xì)胞毒性限制了臨床應(yīng)用,且其本身帶有大量正電荷,在人體血清中容易吸附帶負(fù)電的血清蛋白發(fā)生聚集,從而被排出體外。醫(yī)學(xué)臨床應(yīng)用呼喚開(kāi)發(fā)基于低毒小分子聚陽(yáng)離子的基因載體材料,但一直以來(lái)這項(xiàng)研究進(jìn)展緩慢。

小分子聚乙烯亞胺,由于其細(xì)胞毒性低,非常廉價(jià)易得,在核酸載體應(yīng)用方面受到越來(lái)越多的關(guān)注,但其在干細(xì)胞和原代細(xì)胞方面,展現(xiàn)出極低的轉(zhuǎn)染效率,不能達(dá)到基因治療的效果。因此,亟待開(kāi)發(fā)一種新型聚陽(yáng)離子基因載體材料,應(yīng)用在這些功能細(xì)胞中。

通過(guò)研究,郭天瑛課題組發(fā)現(xiàn),小分子聚陽(yáng)離子的轉(zhuǎn)染效率明顯低于其對(duì)應(yīng)的高分子量聚陽(yáng)離子,這很大程度上是因?yàn)樗鼈儗?duì) DNA 的作用力不夠強(qiáng),壓縮 DNA 不夠緊密。郭天瑛課題組嘗試在小分子聚乙烯亞胺上修飾一種生物體內(nèi)可還原的鋅配位二甲基吡啶胺 (Zn-DPA) 衍生物,得到安全的聚合物 Zn-PD。

“人體 DNA 中含有大量磷酸酯組分,與 Zn-DPA 衍生物具有非常強(qiáng)的相互作用,細(xì)胞培養(yǎng)用 Zn-DPA 衍生物修飾小分子聚乙烯亞胺,得到的 Zn-PD 作為基因載體可以有效增強(qiáng) DNA 壓縮能力;另一方面,細(xì)胞膜包含大量的磷脂雙分子層,與 Zn-DPA 衍生物之間的強(qiáng)相互作用可以促進(jìn)復(fù)合物的細(xì)胞內(nèi)吞,這大大提升了 Zn-PD 轉(zhuǎn)染率。”
*    HPLC含量測(cè)定    100mg    100423-200901
*    含量測(cè)定    50mg    100424-200301
*    含量測(cè)定     100mg     100425- 200702 
*    鑒別    50mg    100426-200301
*    含量測(cè)定    50mg    100427-200301
*    HPLC含量測(cè)定    50mg    100428-200401
*    HPLC含量測(cè)定    50mg    100429-200401
*    含量測(cè)定    100mg    100430-200501
尿蘘素        50mg    100431-
枸櫞酸噴妥維林    含量測(cè)定    50mg    100432-200401
細(xì)胞培養(yǎng)

 

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