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上海莼試生物技術有限公司
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細胞凋亡檢測方法的介紹

時間:2018/4/8閱讀:163
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細胞凋亡檢測可以:
用于腫瘤細胞和組織在內的不同種類病理標本研究;
應用于臨床診療,新藥研制、生物制品開發、腫瘤放*、以及從促凋亡角度探索腫瘤的基因治療;
對相關疾病的早期發現、放*的療效評價具有舉足輕重的地位。
細胞凋亡的檢測方法有很多,下面介紹常用的測定方法。
形態學檢測法
實驗方法原理
根據凋亡細胞固有的形態特征,使用合適的顯微鏡檢測凋亡細胞形態變化。
光學顯微鏡和倒置顯微鏡
(1)未染色細胞:凋亡細胞的體積變小、變形,細胞膜完整但出現發泡現象,細胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。
(2)染色細胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化,核膜裂解、染色質分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形態。
熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡
一般以細胞核染色質的形態學改變為指標來評判細胞凋亡的進展情況。
常用的 DNA 特異性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258),DAPI。三種種染料與 DNA 的結合是非嵌入式的,主要結合在 DNA 的 A-T 堿基區。紫外光激發時發射明亮的藍色熒光。
Hoechst 是與 DNA 特異結合的活性染料,儲存液用蒸餾水配成 1 mg/ml 的濃度,使用時用 PBS 稀釋,終濃度為 10 ug/ml。
DAPI 為半通透性,用于常規固定細胞的染色。儲存液用蒸餾水配成 1 mg/ml 的濃度,使用終濃度一般為 10 ug/ml。
結果評判:細胞凋亡檢測過程中細胞核染色質的形態學改變分為三期:Ⅰ期的細胞核呈波紋狀(rippled)或呈折縫樣(creased),部分染色質出現濃縮狀態;Ⅱa 期細胞核的染色質高度凝聚、邊緣化;Ⅱb 期的細胞核裂解為碎塊,產生凋亡小體。
含量測定    100mg    100921-200701    *
    100mg    100922-    鹽酸苯乙雙胍
系統適用性    30mg    100925-200701    7-表-10去乙酰基*
系統適用性    30mg    100925-200701    *雜質A
供檢查用    30mg    100926-200701    三尖杉寧堿
供檢查用    30mg    100927-200701    7-表*
含量測定    100mg    100928-200701    * 
含量測定    100mg    100934-200701    雌三醇
含量測定    100mg    100938-200701    *
含量測定    100mg    100939-200701    *
含量測定    100mg    100941-200701    * 
細胞凋亡檢測

 

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