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SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞(亞系) ;293T/17說(shuō)明書(shū)

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SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞(亞系) ;293T/17說(shuō)明書(shū):
細(xì)胞名稱 SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞(亞系) ;293T/17 
形態(tài)特性 上皮樣  
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng) 
特征特性 該細(xì)胞來(lái)源于表達(dá)SV40T抗原的293T細(xì)胞;可以產(chǎn)生高滴度的有感染性的逆轉(zhuǎn)錄病毒。 
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;4mM L-glutamine 
傳代方法 1:4~1:8傳代;2~3天換液1次。 
傳代情況 
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS  
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)     
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞(亞系)依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它之成份和比例, 制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類, 若因?qū)嶒?yàn)需要, 必須有所不同時(shí), 務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成, 確定細(xì)胞適應(yīng)后, 方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞(亞系)FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清),對(duì)細(xì)胞而言差異*,請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單之血清種類培養(yǎng)之。
將培養(yǎng)基置于 37 °C水槽中回溫,回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之, 移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管, 立即放入37 °C 水槽中快速解凍, 水面高度不可接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿, 否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化后, 以70 % ethanol 擦拭冷凍管外部, 移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。
依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)取 10 ml培養(yǎng)基加至 T25或 T75 flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25 或T75 flask 內(nèi)之培養(yǎng)基, 混 合均勻,放入37 °C,5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1 % 以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。唯對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO 敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO 者, 則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5 - 10 ml 培養(yǎng)基中,離心300 xg (約1000 rpm),5 分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后, 轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中, 再放入37 °C, 5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞(亞系) ;293T/17處理方式為︰
1. 于寄送過(guò)程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask 均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask 外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象,若有任何問(wèn)題, 不要打開(kāi)蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。
2. 將原封之T25 flask 靜置于37 °C, 5 % CO2 培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37 °C, 并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基,(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml 培養(yǎng)基于flask 內(nèi),依 一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤(pán), 則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
超氧陰離子清除劑TEMPOL溶液    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    規(guī)格:    1毫升/500毫摩爾
細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化氫(H2O2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    規(guī)格:    20次
組織脂質(zhì)過(guò)氧化氫(H2O2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    規(guī)格:    20次
植物脂質(zhì)過(guò)氧化氫(H2O2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    規(guī)格:    20次
食物脂質(zhì)過(guò)氧化氫(H2O2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    規(guī)格:    20次
V40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞(亞系) ;293T/17

 

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