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對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)怎么換液?

時(shí)間:2017-8-16閱讀:445
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細(xì)胞培養(yǎng)處于旺盛增殖期后,消耗了培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng),產(chǎn)生的細(xì)胞代謝產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞繼續(xù)增殖產(chǎn)生不利影響,因此需要及時(shí)更換培養(yǎng)基,這一過程稱為換液。
 
環(huán)境準(zhǔn)備:相對(duì)密封、防塵、防菌的無(wú)菌室
 
操作者準(zhǔn)備:雙手清潔呈可操作狀態(tài)
 
物品準(zhǔn)備:超凈工作臺(tái)、CO2培養(yǎng)箱、95%酒精燈、PBS、(較常用)、10?S(DMEM)(根據(jù)需要)、巴氏吸管、75%酒精棉球罐、廢液缸。
 
(a)細(xì)胞換液步驟:
 
1. 打開層流,打開層流間和超凈臺(tái)的紫外線燈,廢液缸和吸管同時(shí)照射;
 
2. 把水浴鍋調(diào)整到37℃ 并使其穩(wěn)定;
 
3. 將新鮮培養(yǎng)基放置到水浴鍋中,注意防止水面高于瓶肩,100ml液體保持10分鐘,(200ml液體保持15分鐘,500ml液體保持20分鐘),間或搖動(dòng);
 
4. 著無(wú)菌服裝,帽子,口罩和手套
 
5. 用75%乙醇消毒培養(yǎng)基瓶外壁,放置到超凈臺(tái)上;
 
6. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶取出,用75%乙醇棉球消毒瓶底;
 
7. 用吸管吸棄舊培養(yǎng)基,更換吸管,于非細(xì)胞培養(yǎng)面加入新鮮培養(yǎng)基;
 
8. 記錄實(shí)驗(yàn)過程和細(xì)胞培養(yǎng)瓶號(hào)。
 
(b)細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng):
 
1、全程無(wú)菌操作觀念要強(qiáng);
 
2、加培養(yǎng)液時(shí),不可直接加到細(xì)胞貼壁的面上
 F-TESTO     大鼠游離睪酮     規(guī)格:    48T/96T
 f-βCG     大鼠游離β絨毛膜*     規(guī)格:    48T/96T
 Hp-IgG     大鼠幽門螺旋菌IgG     規(guī)格:    48T/96T
 INHBP     大鼠抑制素結(jié)合蛋白     規(guī)格:    48T/96T
 INH-B     大鼠抑制素B     規(guī)格:    48T/96T
 OSM     大鼠抑瘤素M     規(guī)格:    48T/96T
 AChE     大鼠乙酰*酯酶     規(guī)格:    48T/96T
 AChRab     大鼠乙酰*受體抗體     規(guī)格:    48T/96T
 Ach     大鼠乙酰*     規(guī)格:    48T/96T
 ALDH     大鼠乙醛脫氫酶     規(guī)格:    48T/96T
 ADH     大鼠乙醇脫氫酶     規(guī)格:    48T/96T
細(xì)胞培養(yǎng)

 

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