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上海莼試生物技術有限公司
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對于細胞培養怎么換液?

時間:2017-8-16閱讀:447
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細胞培養處于旺盛增殖期后,消耗了培養基中的營養,產生的細胞代謝產物對細胞繼續增殖產生不利影響,因此需要及時更換培養基,這一過程稱為換液。
 
環境準備:相對密封、防塵、防菌的無菌室
 
操作者準備:雙手清潔呈可操作狀態
 
物品準備:超凈工作臺、CO2培養箱、95%酒精燈、PBS、(較常用)、10?S(DMEM)(根據需要)、巴氏吸管、75%酒精棉球罐、廢液缸。
 
(a)細胞換液步驟:
 
1. 打開層流,打開層流間和超凈臺的紫外線燈,廢液缸和吸管同時照射;
 
2. 把水浴鍋調整到37℃ 并使其穩定;
 
3. 將新鮮培養基放置到水浴鍋中,注意防止水面高于瓶肩,100ml液體保持10分鐘,(200ml液體保持15分鐘,500ml液體保持20分鐘),間或搖動;
 
4. 著無菌服裝,帽子,口罩和手套
 
5. 用75%乙醇消毒培養基瓶外壁,放置到超凈臺上;
 
6. 將細胞培養瓶取出,用75%乙醇棉球消毒瓶底;
 
7. 用吸管吸棄舊培養基,更換吸管,于非細胞培養面加入新鮮培養基;
 
8. 記錄實驗過程和細胞培養瓶號。
 
(b)細胞培養注意事項:
 
1、全程無菌操作觀念要強;
 
2、加培養液時,不可直接加到細胞貼壁的面上
 F-TESTO     大鼠游離睪酮     規格:    48T/96T
 f-βCG     大鼠游離β絨毛膜*     規格:    48T/96T
 Hp-IgG     大鼠幽門螺旋菌IgG     規格:    48T/96T
 INHBP     大鼠抑制素結合蛋白     規格:    48T/96T
 INH-B     大鼠抑制素B     規格:    48T/96T
 OSM     大鼠抑瘤素M     規格:    48T/96T
 AChE     大鼠乙酰*酯酶     規格:    48T/96T
 AChRab     大鼠乙酰*受體抗體     規格:    48T/96T
 Ach     大鼠乙酰*     規格:    48T/96T
 ALDH     大鼠乙醛脫氫酶     規格:    48T/96T
 ADH     大鼠乙醇脫氫酶     規格:    48T/96T
細胞培養

 

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