細胞凋亡檢測是組成間質和上皮–血管中基質的不溶性結構成分。它不僅是細胞的機械支持結構, 也是供給營養(yǎng)和免疫應答的場所。ECM參與調節(jié)胚胎發(fā)育進程, 決定細胞的黏附與遷移, 在創(chuàng)傷修復和纖維化、細胞的生長、增殖、分化、代謝和腫瘤發(fā)生及轉移中均起著重要作用。作為MSCs微環(huán)境的一個重要組成部分, 研究發(fā)現(xiàn)在纖維黏連蛋白鋪層的培養(yǎng)皿中擴增的MSCs, 可以更好地維持多向分化能力。近, 陳曉東課題組建立了一種采用MSCs細胞外基質鋪層培養(yǎng)骨髓MSCs的方法, 該培養(yǎng)技術系統(tǒng)模擬了MSCs的胞外基質成分, 同時還可能保留了生長因子等活性成分, 可使干細胞的擴增效率得到明顯提高。這一培養(yǎng)體系的基本操作是首先在普通培養(yǎng)皿中培養(yǎng)骨髓基質細胞(stromal cell), 待細胞長滿后去除活細胞, 保留細胞分泌的胞外基質成分, 隨后以此培養(yǎng)皿為載體, 進一步培養(yǎng)擴增新的 MSCs。該研究不僅證實了胞外基質在骨髓MSCs微環(huán)境中的重要作用, 同時也為研究干細胞微環(huán)境提供了重要的體外模型。

值得指出的是, 雖然胞外基質誘導MSCs增殖的方法*, 但擴增效率很不穩(wěn)定, 不同代次和狀態(tài)的細胞制備出來的細胞外基質之間的MSCs擴增效率有較大差異, 高代次的年老細胞制備的基質明顯不如低代次的年輕細胞。有趣的是, Chen等的工作也揭示了骨髓源ECM與其他細胞外基質一樣也是由納米級的超細纖維構成的這一基本事實, 如圖1所示。他們的工作提示, 基于模擬細胞凋亡檢測微環(huán)境的ECM的干細胞培養(yǎng)和擴增方法, 將為大規(guī)模擴增具高度功能性的MSCs提供新的思路并有著較高的可行性。因此, 進一步分析胞外基質中的關鍵成分以指導對仿生支架材料的修飾, 進而建立規(guī)模化的干細胞培養(yǎng)和擴增的微環(huán)境十分必要。
Valproic Acid     500mg    99-66-1     丙戊酸標準品
Zolazepam Hydrochloride    500mg    33754-49-3     鹽酸唑拉西泮標準品
Methyl Linoleate     5×50mg    112-63-0     *甲酯標準品
Methyl Linolenate     5×50mg    301-00-8     亞麻酸甲酯標準品
Insulin Lispro    5.97mg    133107-64-9     賴脯胰島素標準品(2-8℃)
    5.25oz        氟化牙粉：單氟磷酸鈉(1500 ppm)/二氧化硅標準品
    5 vials    50-56-6     羥可待酮標準品
Corticotropin    5 vails    9002-60-2    促腎上腺皮質激素標準品
    4vials    04-93-9     鹽酸*標準品
    4oz        氟化牙粉：氟化鈉/*粉標準品
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細胞凋亡檢測