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上海莼試生物技術有限公司
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細胞培養初代消化培養法

時間:2018-3-21閱讀:766
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1.細胞培養準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。

3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青*的混合液中30~60分鐘。

4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的*液,然后一并倒入三角燒瓶中,結扎瓶口或塞以膠塞。

5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6.分離:在消化過程中見消化液發混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養液。

7.計數:用計數板計數,如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養液調整后,分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調整。

8.細胞培養培養:置于36.5℃溫箱培養,如用CO2溫箱培養,瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時需要換新塞。
含量測定    含量:    進口/國產    D-木糖    20mg/支    英文名稱    111508-200404    規格:
含量測定    含量:    進口/國產    三十烷醇    20mg/支    英文名稱    111509-200302    規格:
含量測定    含量:    進口/國產    愈創木酚    20mg/支    英文名稱    111510-200202    規格:
含量測定    含量:    進口/國產    濱蒿內酯    20mg/支    英文名稱    111511-200001    規格:
含量測定    含量:    進口/國產    異龍腦    20mg/支    英文名稱    111512-200201    規格:
鑒別    含量:    進口/國產    漢黃芩素    20mg/支    英文名稱    111514-200403    規格:
鑒別    含量:    進口/國產    甜菊苷    20mg/支    英文名稱    111515-200001    規格:
細胞培養

 

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