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上海莼試生物技術有限公司
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細胞凋亡檢測形態特征

時間:2018-4-9閱讀:110
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細胞凋亡檢測根據其性質、起源及生物學意義區分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界,在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序發生事件的組合,是細胞遵循一定規律自己結束生命的自主控制過程。細胞凋亡具有可鑒別的形態學和生物化學特征。
在形態上可見凋亡細胞與周圍細胞脫離接觸,細胞變園,細胞膜向內皺縮、胞漿濃縮、內質網擴張、細胞核固縮破裂呈團塊狀或新月狀分布、內質網和細胞膜進一步融合將細胞分成多個完整包裹的凋亡小體,凋亡小體后被吞噬細胞吞噬消化。在凋亡過程中細胞內容物并不釋放到細胞外,不會影響其它細胞,因而不引起炎癥反應。
在生物化學上,多數細胞凋亡的過程中,內源性核酸內切酶活化,活性增加。核DNA隨機地在核小體的連接部位被酶切斷,降解為180-200bp或它的整倍數的各種片斷。如果對核DNA進行瓊脂糖電泳,可顯示以180-200bp為基數的DNA ladder(梯狀帶紋)的特征。
相比之下,壞死是細胞處于劇烈損傷條件下發生的細胞死亡。細胞在壞死早期即喪失質膜完整性,各種細胞器膨脹,進而質膜崩解釋放出其中的內容物,引起炎癥反應,壞死過程中細胞核DNA雖也降解,但由于存在各種長度不等的DNA,不能形成梯狀帶紋,而呈彌散狀。
一些溫和的損傷刺激及一些抗腫瘤藥物可誘導細胞凋亡,通常這些因素在誘導凋亡的同時,也可產生細胞壞死,這取決于損傷的劇烈程度和細胞本身對刺激的敏感程度。
三尖杉酯堿(HT)是我國自行研制的一種對急性粒細胞白血病,急性單核白血病等有良好療效的抗腫瘤藥物。研究表明HT在0.02~5μg/ml范圍內作用2小時,即可誘導HL-60細胞凋亡,細胞凋亡檢測表現出典型的凋亡特征。本實驗用1μg/ml HT在體外誘導培養的HL-60細胞發生凋亡,同時也有少數細胞發生壞死。用Hoechst33342和碘化丙啶(propidium iodide,PI)對細胞進行雙重染色,可以區別凋亡、壞死及正常細胞。
Dibucaine Hydrochloride    500mg    鹽酸地布卡因標準品    1961/12/1
Dibutyl Phthalate    200mg    鄰苯二甲酸二丁酯標準品    84-74-2
Dibutyl Sebacate (AS)    1ml    癸二酸二丁酯標準品    109-43-3
Dichloralphenazone CIV    200mg    氯醛比林標準品    480-30-8
Dichlorphenamide    200mg    雙氯非那胺標準品    120-97-8
Diclazuril    200mg    地克珠利標準品    101831-37-2
Diclofenac Potassium    200mg    *標準品    15307-81-0
Diclofenac Sodium    200mg    *標準品    15307-79-6
Dicloxacillin Sodium    500mg    *鈉標準品    13412-64-1
細胞凋亡檢測

 

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