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初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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TaqMan探針法基因分型

時(shí)間:2019-3-14閱讀:1552
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TaqMan探針法是針對(duì)DNA上的SNP位點(diǎn)設(shè)計(jì)PCR引物和TaqMan探針,進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增檢測(cè)的方法,通常用于少量SNP位點(diǎn)的分析,核酸定量分析以及腫瘤細(xì)胞突變分析等。 
探針的5’-端和3’-端分別標(biāo)記一個(gè)熒光報(bào)告基團(tuán)(Reporter,如FAM、VIC、HEX等)和一個(gè)熒光淬滅基團(tuán)(Quencher,如TAMRA、BHQ1等)。當(dāng)熒光探針保持完整時(shí),5′-端報(bào)告基團(tuán)經(jīng)儀器光源激發(fā)的熒光正好被近距離的3′端熒光基團(tuán)淬滅,儀器檢測(cè)不到5′端報(bào)告基團(tuán)所激發(fā)的熒光信號(hào)。 
PCR擴(kuò)增時(shí),加入一對(duì)特異引物的同時(shí),加入一對(duì)特異性的熒光探針,該探針只與模板特異性地結(jié)合,其結(jié)合位點(diǎn)在兩條引物之間。當(dāng)溶液中存在DNA目的片段時(shí),熒光探針與模板退火結(jié)合,隨著PCR的進(jìn)行,熱啟動(dòng)Taq酶在鏈延伸過程中遇到與模板結(jié)合的探針,其5′-3′外切酶活性(此活性是雙鏈特異性的,游離的單鏈探針不受影響)就會(huì)切割探針,釋放5′-端報(bào)告基團(tuán)游離于反應(yīng)體系中,遠(yuǎn)離3′-端熒光淬滅基團(tuán)的屏蔽,破壞兩熒光分子基團(tuán)間的能量轉(zhuǎn)移(FRET),因此5′-端報(bào)告基團(tuán)受激發(fā)所發(fā)射的熒光信號(hào)就可以被探頭檢測(cè)到。每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)累積與PCR產(chǎn)物形成的同步,熒光信號(hào)的強(qiáng)度能夠代表模板DNA的拷貝數(shù)。 
 
技術(shù)原理 
 
結(jié)果示例 
 
服務(wù)內(nèi)容 
1、基因和SNP序列信息分析。 
2、實(shí)驗(yàn)方案討論與確定。 
3、引物和探針的設(shè)計(jì)優(yōu)化。 
4、引物和探針的合成。 
5、qPCR實(shí)驗(yàn)。 
6、數(shù)據(jù)分析整理。 
7、報(bào)告生成。 
服務(wù)流程 
1、提交項(xiàng)目課題相關(guān)需求和資料。 
2、與我們的專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)討論項(xiàng)目細(xì)節(jié)。 
3、根據(jù)討論后的意見對(duì)實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行修改。 
4、雙方均滿意并達(dá)成一致,簽訂技術(shù)服務(wù)合同。 
5、開展實(shí)驗(yàn),按期完成合同規(guī)定的內(nèi)容。 
6、結(jié)題,提供實(shí)驗(yàn)原始結(jié)果和分析結(jié)果、實(shí)驗(yàn)流程、實(shí)驗(yàn)條件等等。 
我們的優(yōu)勢(shì) 
1、提供各種實(shí)驗(yàn)材料和儀器,滿足項(xiàng)目課題實(shí)驗(yàn)需要。 
2、專業(yè)的操作人員。 
3、高規(guī)格實(shí)驗(yàn)室。 
4、數(shù)據(jù)結(jié)果交付周期快。 
5、完善的服務(wù)體系,全程跟進(jìn),確保滿意。 
咨詢與訂購(gòu) 
感謝您選擇我們的服務(wù),如果您有任何問題,請(qǐng)聯(lián)xi我們,我們將竭誠(chéng)為您解答和服務(wù)。 
 

 

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