TaqMan探針法是針對(duì)DNA上的SNP位點(diǎn)設(shè)計(jì)PCR引物和TaqMan探針，進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增檢測(cè)的方法，通常用于少量SNP位點(diǎn)的分析，核酸定量分析以及腫瘤細(xì)胞突變分析等。
探針的5’-端和3’-端分別標(biāo)記一個(gè)熒光報(bào)告基團(tuán)(Reporter，如FAM、VIC、HEX等)和一個(gè)熒光淬滅基團(tuán)(Quencher，如TAMRA、BHQ1等)。當(dāng)熒光探針保持完整時(shí)，5′-端報(bào)告基團(tuán)經(jīng)儀器光源激發(fā)的熒光正好被近距離的3′端熒光基團(tuán)淬滅，儀器檢測(cè)不到5′端報(bào)告基團(tuán)所激發(fā)的熒光信號(hào)。
PCR擴(kuò)增時(shí)，加入一對(duì)特異引物的同時(shí)，加入一對(duì)特異性的熒光探針，該探針只與模板特異性地結(jié)合，其結(jié)合位點(diǎn)在兩條引物之間。當(dāng)溶液中存在DNA目的片段時(shí)，熒光探針與模板退火結(jié)合，隨著PCR的進(jìn)行，熱啟動(dòng)Taq酶在鏈延伸過程中遇到與模板結(jié)合的探針，其5′-3′外切酶活性(此活性是雙鏈特異性的，游離的單鏈探針不受影響)就會(huì)切割探針，釋放5′-端報(bào)告基團(tuán)游離于反應(yīng)體系中，遠(yuǎn)離3′-端熒光淬滅基團(tuán)的屏蔽，破壞兩熒光分子基團(tuán)間的能量轉(zhuǎn)移（FRET），因此5′-端報(bào)告基團(tuán)受激發(fā)所發(fā)射的熒光信號(hào)就可以被探頭檢測(cè)到。每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)累積與PCR產(chǎn)物形成的同步，熒光信號(hào)的強(qiáng)度能夠代表模板DNA的拷貝數(shù)。

技術(shù)原理

結(jié)果示例

服務(wù)內(nèi)容
1、基因和SNP序列信息分析。
2、實(shí)驗(yàn)方案討論與確定。
3、引物和探針的設(shè)計(jì)優(yōu)化。
4、引物和探針的合成。
5、qPCR實(shí)驗(yàn)。
6、數(shù)據(jù)分析整理。
7、報(bào)告生成。
服務(wù)流程
1、提交項(xiàng)目課題相關(guān)需求和資料。
2、與我們的專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)討論項(xiàng)目細(xì)節(jié)。
3、根據(jù)討論后的意見對(duì)實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行修改。
4、雙方均滿意并達(dá)成一致，簽訂技術(shù)服務(wù)合同。
5、開展實(shí)驗(yàn)，按期完成合同規(guī)定的內(nèi)容。
6、結(jié)題，提供實(shí)驗(yàn)原始結(jié)果和分析結(jié)果、實(shí)驗(yàn)流程、實(shí)驗(yàn)條件等等。
我們的優(yōu)勢(shì)
1、提供各種實(shí)驗(yàn)材料和儀器，滿足項(xiàng)目課題實(shí)驗(yàn)需要。
2、專業(yè)的操作人員。
3、高規(guī)格實(shí)驗(yàn)室。
4、數(shù)據(jù)結(jié)果交付周期快。
5、完善的服務(wù)體系，全程跟進(jìn)，確保滿意。
咨詢與訂購(gòu)
感謝您選擇我們的服務(wù)，如果您有任何問題，請(qǐng)聯(lián)xi我們，我們將竭誠(chéng)為您解答和服務(wù)。

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TaqMan探針法基因分型

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