ELISA試劑盒的配制：關于每種細胞因子應仔細閱讀說明書，留心每批的細節。在運用細胞因子前，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其間的細胞因子。依據每批說明書中的細節，將凍干的細胞因子復溶。 一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。ELISA試劑盒可利用標準的ELISA操作流程、擴展試劑盒、第三類試劑、或改動酶底物系統可在一定范圍內進步靈敏度。為了優化靈敏度，主張孵育標準品和標本。若運用過氧化物酶作為顯色系統，應禁止在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。
ELISA試劑盒的操作因固相載體的構成不一樣而有所區別，國內醫學查驗一般均用板式點。這篇文章將敘說板式ELISA各個操作過程的留心要害，ELISA檢查試劑盒珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與格外儀器協作運用。
可用作ELISA試劑盒測定的標本非常廣泛，體液（如血清 ）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、大便）等均可作標本以測定其間某種抗體 或抗原成份。ELISA試劑盒有些標本可直接進行測定（如血清 、尿液），有些則需經預處理（如大便和某些分泌物）。這些標本收集的時間、辦法和保存都有一定的請求。
按ELISA試劑盒說明書的請求準備試驗中需用的試劑。ELISA頂用的蒸餾 水或去離子水，包括用于洗刷的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液運用pH計丈量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后運用。試劑盒中本次試驗不需用的有些應及時放回冰箱保存。