對可重復使用的Teledyne ISCO RediSep Silver反相C18和RediSep Gold®高性能C18、C18Aq及C8色譜柱進行適當?shù)念A處理、清洗和儲存,有助于延長柱子壽命并提高其一致性和可靠性。
在使用前,用六倍柱體積(CV)的1:1水:乙腈沖洗柱子。或者,通過柱子泵入兩倍柱體積的100%乙腈,然后蓋上蓋子存放一小時后再使用。有關(guān)柱體積數(shù)據(jù),請參見表1。
表1:色譜柱數(shù)據(jù)
樣品負載能力
色譜柱上的樣品負載應為柱介質(zhì)重量的0.1%到2%。
運行后維護
在適當?shù)木S護下,RediSep C18色譜柱可以使用三十次或更多。反相方法應該編寫成在分離結(jié)束時,用2-4倍柱體積(CV)的高比例(100%)有機溶劑(B溶劑)沖洗柱子。經(jīng)過2-4 CV的沖洗后,可以將有機溶劑的比例恢復到初始條件并沖洗2-3 CV,以準備下一次運行的柱子平衡條件(見圖1)。或者,可以將有機溶劑的比例改為80%,以便為色譜柱存儲做準備。
圖1. 運行后色譜柱沖洗
C18色譜柱可以長時間存儲而不會損失性能。以下是反相C18色譜柱存儲的一些通用規(guī)則:
• 一旦潤濕后,切勿讓反相色譜柱干燥。這將由于固定相的膨脹和收縮而導致通道效應。如果Flash色譜系統(tǒng)上有空氣吹掃功能,應關(guān)閉該功能。
• 將色譜柱濕潤并蓋好,存儲在含有10-30%水和70-90%有機溶劑(如乙腈、甲醇或乙醇)的環(huán)境中。
在使用前預處理色譜柱。用高比例(100%)有機溶劑清潔色譜柱。切勿讓色譜柱干燥,并以70-90%有機溶劑濕潤和蓋好存儲。
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