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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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ATCC細(xì)胞
檢測(cè)試劑盒
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分子生物學(xué)
培養(yǎng)基
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細(xì)胞培養(yǎng)
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標(biāo)準(zhǔn)品

ATCC細(xì)胞傳代標(biāo)準(zhǔn)

時(shí)間:2017/6/27閱讀:435
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ATCC細(xì)胞傳代時(shí)間一般通過兩個(gè)方面進(jìn)行確定:一是在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,當(dāng)培養(yǎng)液由于pH值下降而呈現(xiàn)黃色時(shí),表明細(xì)胞已經(jīng)達(dá)到Z大密度,需要換液或進(jìn)行傳代培養(yǎng);二是觀察細(xì)胞形態(tài),健康細(xì)胞形態(tài)飽滿,折光性好,生長(zhǎng)致密時(shí)即可傳代。初代培養(yǎng)的傳代很重要,是建立細(xì)胞系的關(guān)鍵時(shí)期。在傳代時(shí)一般要特別注意以下3點(diǎn):

ATCC細(xì)胞沒有生長(zhǎng)到足以覆蓋瓶底壁的大部分表面之前,不要急于傳代。

②原代培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞多為混雜生長(zhǎng),上皮樣細(xì)胞和成纖維樣細(xì)胞并存的情況很常見。傳代時(shí)不同的細(xì)胞有不同的消化時(shí)間,因此要根據(jù)需要,注意觀察及時(shí)進(jìn)行處理,并可根據(jù)不同細(xì)胞對(duì)胰蛋白酶的耐受時(shí)間不同而分離和純化所需要的細(xì)胞。另外早期傳代的培養(yǎng)細(xì)胞較已經(jīng)建系的培養(yǎng)消化時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)。吹打細(xì)胞時(shí)動(dòng)作要輕巧,盡可能減少對(duì)細(xì)胞的損傷。

③傳代時(shí)細(xì)胞接種數(shù)量要多一些,使ATCC細(xì)胞能盡快適應(yīng)新環(huán)境有利于細(xì)胞生存和增殖。隨消化分離而脫落的組織塊也可一并傳人新的培養(yǎng)瓶。

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