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細(xì)胞培養(yǎng)受環(huán)境產(chǎn)生影響

時(shí)間:2018-5-11閱讀:273
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把體外細(xì)胞培養(yǎng)當(dāng)作體內(nèi)生理功能模型的合理性常受到人們質(zhì)疑.由于環(huán)境的改變,培養(yǎng)細(xì)胞通常不表現(xiàn)體內(nèi)同類細(xì)胞的特征.另外,同一細(xì)胞系缺乏異質(zhì)性和體內(nèi)細(xì)胞的三維結(jié)構(gòu),并且激素和營養(yǎng)環(huán)境也發(fā)生了改變,細(xì)胞與細(xì)胞,細(xì)胞與胞外基質(zhì)的相互作用減弱,有利于非特化細(xì)胞鋪展,遷移和增殖,但不利于表達(dá)分化特征.環(huán)境通過以下四條途徑對培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生影響:
1,細(xì)胞生長的附著物或支持物性質(zhì),它們可以是固體(如單層細(xì)胞生長的塑料板或其他鋼性基板),也可以是半固體(如膠原凝膠或瓊脂凝膠),還可以是液體(如懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液);
2,與其他細(xì)胞的接觸程度;
3,培養(yǎng)基的理化性質(zhì)和成分;
4,氣相成分;
5,培養(yǎng)溫度,合適的環(huán)境,包括附著物,營養(yǎng),激素和支持物等是細(xì)胞表現(xiàn)特定功能的基礎(chǔ).合適的環(huán)境,包括附著物,營養(yǎng)物和激素(或生長因子)的濃度.細(xì)胞間相互作用等是細(xì)胞表現(xiàn)特定功能的基礎(chǔ)。

對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。

一般傳代可直接將細(xì)胞培養(yǎng)原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

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20mg 利塞膦酸相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 75755-10-1

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細(xì)胞培養(yǎng)

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