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定氮儀儀器安裝前的清洗工作分析

來源:杭州麥哲儀器有限公司   2013年03月30日 15:48  

凱氏定氮儀是利用凱氏定氮法對物質中蛋白質含量進行測定的儀器。凱氏定氮儀按其配置分,可以分為全自動凱氏定氮儀和全自動定氮儀。其中全自動凱氏定氮儀包括消化爐和凱氏蒸餾裝置。凱氏定氮儀操作時可以分為人工模式和自動模式,不同的實驗者,可以根據對實驗操作的熟練程度,自由選擇哪種方式。一般的,新手我們推薦使用自動模式,可以為你省去很多的步驟。目前,凱氏定氮儀已經廣泛使用于測定乳核乳制品中蛋白質的測定。

下面我們主要介紹下,我們在使用定氮儀測定蛋白質含量時,如何清洗定氮儀。

儀器安裝前,凱氏定氮儀各部件需經一般方法洗滌干凈,所用橡皮管、塞須浸在10%NaOH溶液中,煮約10min,水洗、水煮10min,再水洗數次,然后安裝并固定在一只鐵架臺上。

儀器使用前,微量全部管道都須經水蒸氣洗滌,以除去管道內可能殘留的氨,正在使用的儀器,每次測樣前,蒸氣洗滌5min即可。較長時間未使用的儀器,重復蒸氣洗滌,不得少于三次,并檢查儀器是否正常。仔細檢查各個連接處,保證不漏氣。這樣,一方面保證了儀器的清潔,另一方面,也同時對儀器進行了檢查,一些壞的零部件,可以及時被查出并替換。

儀器安裝完后,我們需具體對儀器的內部進行清潔。首先在凱氏定氮儀蒸氣發生器中加約2/3體積蒸餾水,加入數滴硫酸使其保持酸性,以避免水中的氨被蒸出而影響結果,并放入少許沸石(或毛細管等),以防爆沸。這個步驟有點類似于凱氏定氮法的消化前步驟,用相應的試劑對其進行清洗。沿小玻杯壁加入蒸餾水約20mL讓水經插管流入反應室,但玻杯內的水不要放光,塞上棒狀玻塞,保持水封,防止漏氣。這一步可直接驗證插管是否可以使用。蒸氣發生后,立即關閉廢液排放管上的開關,使蒸氣只能進入反應室,導致反應室內的水迅速沸騰,蒸出蒸氣由反應室上端口通過定氮球進入冷凝管冷卻,在冷凝管下端放置一個錐形瓶接收冷凝水。從定氮球發燙開始計時,連續蒸煮5min,然后移開煤氣燈。沖洗完畢,夾緊蒸氣發生器與收集器之間的連接橡膠管,由于氣體冷卻壓力降低,反應室內廢液自動抽到反應室外殼中,打開廢液排出口夾子放出廢液。整個清洗過程,到這里就結束了,經過清洗這個過程,儀器內部環境已經符合我們測定蛋白質含量的需求,另外,儀器的各部件也得到了檢驗,可以及時更換漏氣或者其他壞了的部分。根據以上步驟重復清洗2~3次,再在冷凝管下換放一個盛有硼酸-指示劑混合液的錐形瓶使冷凝管下口*浸沒在溶液中,蒸餾1~2min,觀察錐形瓶內的溶液是否變色。如不變色,表示蒸餾裝置內部已洗干凈。移去錐形瓶,再蒸餾1~2min,用蒸餾水沖洗冷凝器下口,關閉煤氣燈,儀器即可供測樣品使用。

這樣,蛋白質測定儀整個清洗過程就結束了。凱氏定氮儀在測定蛋白質含量前,一般都需要經過清洗,這樣對于測定結果,會更加。另外,也可以保證實驗室人員的安全,因為在清洗過程中,對儀器進行了檢查,排除了因為儀器的故障而造成了危險。

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